冻存细胞

冰罗布

向高手请教一个问题：
7 I+ c9 W$ E! N# G5 {  如果我想冻存小鼠的成纤维细胞，需要加入血清和二甲基亚砜吗？对于不同生长情况的细胞还需要加入其它的试剂吗？

小鲁鲁

这种的细胞我冻过的。
- [5 Q( _; f4 k! \8 P" s配方如下：血清>=20%，DMSO=10%，其余的用培养基补。也就是说，血清和DMSO是必需的，如果不怕浪费，直接用90%血清和10%DMSO也很好。
# ?0 c/ l3 _3 Z9 \( p一般不需要加入其它的试剂，因为冻存最好选对数期的细胞，要不复苏的时候细胞状态不好。

biomaterial

对头，一般是细胞悬液、血清、DMSO（或甘油）为7：2：1的比例冻存细胞

冰罗布

细胞培养液是DMEM吗？

Jocelyn

回复 4# 冰罗布 + m! C) X4 q" X
( m0 H( f6 C6 K8 t8 _& u9 x: F& y
0 {- _. N: S# m: L$ C) m" k  h
   冻存时的培养基一般与培养时的培养基相同~~~能否发点你的成纤维细胞的图呢~~?

冰罗布

回复 5# Jocelyn + v' h0 F1 {3 [; N# s4 W/ F
2 ~) m/ I& Q: j" y4 k
8 w8 Z, ?$ N* W- Q$ |
    对不起，让您失望了，目前我还处于探索阶段，并没有图片，抱歉。

bleachbaili

和三楼用法一致，7：2：1，肯定可以用的，放心吧

冰罗布

谢谢各位。

luoye1986

我比较同意DMSO:FBS=1:9的，我做过，效果还可以

czzhaozhu

DMSO的比例是固定的10%，而血清则是越多越好，对细胞保护作用大，至于DMEM剩下就用它补充。