培养基配制问题疑问

火云豹

求助：模仿EmorA的肺癌肿瘤细胞的悬浮成球实验  U5 s+ B% q5 N- x# k1 a5 I( a
所用的培养基配制每200ml无血清 DMEM/HamSF12培养基中加入5mg 牛胰岛素、20mg人转铁蛋白、 1.2g右旋葡萄糖、 1.038μg亚硒酸钠、0.8g牛血清白蛋白、l.265mg孕酮、2 mg腐胺、4mgEFG、2mgbFGF、0.8mg肝素和2ml 1%青链霉素
7 P4 W9 ?/ \! S: T+ P# u最后要求要过滤 用多少微米的的过滤器合适啊 还有上面的成分是粉末状 有的人说有液体配好的剂型 选哪个更好呢 谢谢

hcoohboy

一般的培养基都是0.22um过滤除菌的，这个也不例外啊。
& @9 J5 e) K1 k$ p1 K: `* y0 s# t液体的商品化的培养基可能稳定一点，自己配的粉剂可能每次有差别，但这并不是绝对的。

火云豹

第一次做 没有经验 欢迎做过的战友指点

zhliu0603

我过滤1640培养基时用两层滤膜，上面是0.45μm下面是0.22μm的。用超存水将粉末配成液体，混匀，再调pH值，然后超净台抽滤，不知对你有没有帮助。祝实验顺利

susanliuxue

肿瘤干细胞都能成球吗

luckyfool

点二二微米的滤器

火云豹

谢谢

wryyx

0.22微米的滤器。如果用量大，可以让Hyclone特别配置。

dilal

0.22μm的滤器过滤就行了，主要是为了过滤掉细菌，所以要比细菌直径小就行，常规的都选用0.22μm。
# I" u7 F# v$ Z2 _& f7 l液体配好的剂型运输起来比较麻烦，建议用粉剂自己配，同时也保证了可以根据自己的情况进行浓度调整。

火云豹

哈哈 目前是采用的商用培养基D/F12 在其中加入上述成分 细胞成球效果不错 呵呵