悬浮培养的神经干细胞如何传代及制备以临床应用？？急！！

luoye1986

悬浮培养的神经干细胞如何传代，和为了临床应用而如何制备？需具体步骤。谢谢！急用！！！

norther817

2种方法：
  _& s. q! G9 ]# k+ j1 `6 f% f1.化学消化：胰酶消化2-3分钟（时间尽量短），轻轻吹打20-30下，可达到单细胞悬液效果。9 t% R, ^) R0 Q* k- `
2.机械法：细胞滤网，根据球大小，可以选择100um、40um滤网，滤过机械分割后，轻轻吹打至单悬。
8 m3 C# M% t- r* `以上2种，我们都用过，都是有效的。

smkx

3 D+ K' \  N- Q/ j, C& G0 Y
$ [+ m& Z6 D3 R/ K
For passage, the primary spheres were collected in sterile tubes,
' @1 z, I4 i% p+ [: g( eincubated for 45–60 min at 37 ◦C in 250mL undiluted TrypLETM
4 g7 L: v+ L; a: X+ K5 kExpress solution (Gibco Invitrogen) per 6mL culture-derived pellet,0 o  e4 s; \' y: I/ _4 \3 P$ W* a2 f
and dissociated gently with a 26G steel syringe7 W, j" m; X" ]3 ~/ D% [8 Q" N1 w
这是猪的NSC.我们直接用枪吹打。40次左右就可以了。