细胞传代问题

tefuir

细胞传代，一天之后观察细胞状态，发现细胞密度很低，贴壁细胞甚少，上面悬浮一层死细胞，想知道会是什么原因导致的？还请各位大神指点

细胞分裂

传代之前有没有计活率，有没有观察细胞状态怎么样？种瓶密度是多少？培养箱有没有问题，培养基有没有问题？
% T* m9 Q3 X/ y! b8 n3 F

tefuir

回复 细胞分裂 的帖子
! l$ b" U8 N7 u' I/ K
3 u+ J" T8 {1 U2 _7 m2 {' p7 Z传代之前没有计算活率，但是细胞接种密度是够用的，细胞状态也是挺好的，培养箱盒培养基都没有问题，细胞并没有染菌，就是状态不太好，生长速度有点慢，我应该注意点什么呢？

细胞分裂

传代之前最好计算一下活率，死细胞多也会影响细胞生长，如果死细胞多，隔天要换下液或者补下液，如果有条件的话最好测下细胞培养箱的二氧化碳的稳定性和温度的稳定性

a1249471827

学习了，最近也在学习培养细胞，不知您找到原因没有，有没有考虑过是培养基方面的问题呢，比如pH，内毒素什么的；还有上一代传代之前是不是长的就不好呢

iytbxxg

1、你传代前的操作是什么，如果是把培养的细胞收集起来的话，你就是可能胰酶消化太长时间了，一般不能消化超过五分钟，如果酶的活性很好，只消化一分钟足够了。2、如果你是复苏后传代的话，细胞的冷冻过程、储存条件和细胞复活都是会影响细胞活率的，所以不知道前面操作怎么样，不好给你断定。

卓俊文

考虑下酶浓度和消化时间，再有就是吹打力度。

15558156935

一般这样是酶浓度过高消化时间过长导致的