小鼠饲养层细胞的鉴别？

zsc78

可能关键在于胚胎是12.5天到13.5天，只要是这个时间段的胚胎，按照MEF的分离方法分离出来的细胞绝大部分都是成纤维细胞，不需要鉴定，其它的就是形态观察，好像没有必要进行特别的鉴定。其实更重要的是需要进行污染鉴定。

leestone

一般取得MEF之後，仍然需要在DMEM＋10％FCS的medium中繼個4~5代(P4~P5)
# s6 ~( V4 \  U0 B! s在繼代的過程中- B6 r( [$ l+ q8 V# k! x
經由medium及trypsin的篩選1 X* F) b% ]2 v; U! d" a
此時的MEF已經具有相當的純度可以做為飼養層細胞使用' m$ b+ q& [7 }3 v
至於使用P0的MEF要用來做iPS的話，
& {. b" d3 M! J9 n* _% Q# J% X6 M$ @的確會有多能性細胞污染的小風險
3 @' m' k* d; \0 C不過如果Control做好應該還是可以用來做實驗的
$ J6 C6 `3 X1 K/ A另外樓上說得污染鑑定的確蠻重要的9 H8 s0 @; h; D3 B* V9 E+ M+ p8 J
尤其是黴漿菌(microplasma）的問題3 Z- J2 ]7 ?, J
因為無法在顯微鏡底下觀察到，必須跑PCR才有辦法確認
2 D. t5 ~! u" P! L6 U* E& [如果用到有microplasma contamination的MEF養胚幹細胞
. t; X4 |5 V: q3 w8 t3 P3 l對於實驗可是相當大的影響喔

yuangaoqian

我想问一下cony   红细胞不是不贴壁吗   为什么培养过程中还有红细胞污染呢

excellbio

那如果买 REPROCELL 公司的这个MEF 和SL10 不可以吗