小鼠饲养层细胞的鉴别？ - 胚胎干细胞专区干细胞之家



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wangzhuo822001

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楼主

发表于 2010-4-21 13:16 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

用小鼠胚胎成纤维细胞来支持胚胎干细胞，如果鉴别培养的成纤维细胞是否是纯化的啊？

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沙发

发表于 2010-4-21 19:39 |只看该作者

这个？？？？你冻存的时候混进去别的细胞了吗？

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wangzhuo822001

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藤椅

发表于 2010-4-21 20:55 |只看该作者

不是啊～这个我是自己制备，直接从胚胎小鼠背部取成纤维细胞。其实其他很多使用组织培养细胞也存在一样的问题，就是如何知道我用这个组织培养的细胞最后就是我需要的那种细胞了。是不是必须要鉴定？？或者单细胞培养克隆？或者其他什么更简便的方法？

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wangzhuo822001

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板凳

发表于 2010-4-21 21:48 |只看该作者

从孕12.5天ICR小鼠胚胎躯干部获取小鼠胚胎成纤维细胞

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friendly0722

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报纸

发表于 2010-4-22 13:15 |只看该作者

个人认为这个跟纯度没有很大的影响，只要在12.5-13.5天取小鼠胎儿去掉头尾，四肢，内脏应该没有很大的问题。

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mominglily

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地板

发表于 2010-5-3 16:32 |只看该作者

小鼠成纤维细胞可以释放诸多因子，如：Ⅰ型胶原，它可以作为该类细胞的标记物。
你可以做一下胶原合成实验，这可以验证你从完整胚胎或组织中得到的是否确实是小鼠成纤维细胞。

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zzp40

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7楼

发表于 2010-5-4 20:52 |只看该作者

我做的时候没有鉴定过，不过当时是等细胞贴壁后看细胞形态，成纤维细胞梭行

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cony

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8楼

发表于 2010-5-5 17:36 |只看该作者

原代的时候你会发现很多红细胞，但是消化传代一次以后就没了。

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treestem

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9楼

发表于 2010-5-6 19:32 |只看该作者

做MEF做不到太纯，也不需要完全单一的成纤维细胞。
我们通常所说的成纤维细胞（fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，细胞呈梭形或扁的星状，具有突起。根据不同的功能活动状态，将细胞分为成纤维细胞和纤维细胞二型：成纤维细胞乃是功能活动旺盛的细胞，细胞和细胞核较大，轮廓清楚，核仁大而明显，细胞质弱嗜碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动；纤维细胞（fibrocyte）功能活动不活跃，细胞轮廓不明显，核小着色深，核仁不明显，细胞质少。此二型细胞可互相转化。