大家帮我看看我的细胞里面有没有小鼠MSC？前天晚上取的原代，今晚全部换了液。

tanhehe1006

回复 4# angel-sakura ! n2 \6 X9 U% V3 W% j: `% v

8 D9 h7 W; m; M: W% t% Y7 E* o9 X9 o" Y+ x1 B6 l" a* i
    我用的是骨片分离，想得到干净的骨片很容易，因为我前期做骨骼肌干细胞的，最简单的方法就是先用眼科剪尽量去除肌肉组织。之后用手术刀片刮骨，很容易去除筋膜和肌肉的。去掉干骺端。这个实验一定要好好冲洗髓腔

mahong_ok

血细胞太多了，需要的细胞很少

jisuyun

血细胞太多了，需要的细胞很少
  f1 o* }& C' U; _2 r. T! ^3 Jmahong_ok 发表于 2010-4-23 14:08

& ~3 R1 H' ^( ^" |% \% h! h

0 l7 ~1 {. r) L( ]' V2 {$ Y: H/ q0 U6 j: V/ j* V
有什么办法下次做的时候让血细胞少点？& N9 W0 w, G4 J- @
这次的细胞再过几天换液比较好？

angel-sakura

回复 13# jisuyun - _9 X  P4 a2 Y& E
先不要怎么急着换液吧，刚从体内移到体外，环境变化很大，如果太早移走其他细胞的话可能会不利于BMSC的生长和贴壁，因为不同细胞之间存在着相互作用。我导师建议我4~5天再换液，此外，分离出的BMSC接种的时候最好细胞密度不要太大了，以防杂细胞太多占位效应抑制BMSC的生长，细胞生长是需要空间的。不过个人认为应该根据实际情况来判断是否换。

jisuyun

我们的摇床怎么只有转速，不能恒温。
5 Y5 Y. e- p! u( w# c" q放在室内二十多度可以吗？
9 t4 ]4 t  @- X8 j+ Q我上次的那个圆圆的细胞渐渐飘起来很多，梭形的细胞越来越多了，很开心。离上次全量换液又有72h了，要不要再过两天再换？
7 U% a5 a3 I% {  P如果可以，晚上放图片。

tnfsf10

你的照片中还是可以看见一些贴壁细胞，有点纤维状。一般来说，48小时可以看到了。6 e/ ?/ o- J- n3 ]4 E
就是贴壁细胞比较少。

kqyy

目的细胞很多的 ,集落也出现了,一般初次换液后生长会很快的.恭喜你>

jisuyun

9 y  r8 z; v6 h! D4 w0 `4 q4 @
0 y8 _% B. `, v! X  v6 k" ^
今天第14天，本来想半量换液的，没想这么早传代。可是大脑开小差一不留神把培养瓶口多烧了几秒钟，瓶口立即严重变形。好心痛，一时之间不知道该怎么办。: J; ~1 c* v9 J. T5 P9 b
匆忙之中赶紧融化胰酶预热PBS，先用GIBCO 0.25胰酶+EDTA消化约3分钟，放到1瓶里，消化完忘记吹打，只是摇了一摇，发现瓶子里还有约40%细胞，现在想想如果吹打一下很多会掉下来。于是再把剩下的又加了胰酶消化3分钟，又放了一瓶，想看看2瓶以后长的有什么区别。最后再看原来的瓶子几乎没有细胞了。
. P% t' C* T9 H# V1 l) o传代时间会不会早了点？以后几天换液呢？全量还是半量？

why121

我按照书上所说24H半量换液 然后2-3天全量换液 这样行嘛？请指教