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用加抗生素的盐水能洗去菌吗

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包包
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发表于 2018-11-20 16:33 |显示全部帖子
请教各位老师,用加了抗生素的培养基培养细胞,如果有菌的话,14天内会死掉吗,还是只是抑制它生长?加抗生素洗涤能洗去吗

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包包
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发表于 2018-11-21 14:54 |显示全部帖子
这个还真没试过唉。

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包包
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发表于 2018-11-28 14:30 |显示全部帖子
希瑞干细胞
本帖最后由 阿秀哥 于 2018-11-28 14:31 编辑 * b3 u- t- Q6 O8 \& J' c; `
- }& l" A* V6 k' {
处理细菌污染的重要原则就是:无限地稀释细菌的浓度,无限地减少细菌的数量!( w3 ~2 E% m$ K9 o0 l) d
1).将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。. v1 P7 l/ p4 f& b/ T' p
2).继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。" n* R# S* B* z, t2 x+ c
3).继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。
/ b& {1 }. e1 v9 M9 O( m; S( ]% f4).重复步骤3再洗。- k) W6 [' U+ ~' p" N
5).重复步骤3再洗。
& b+ q8 |& A4 h5 _6).加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。
8 ^* v6 m7 N9 i* H2 u* |. f/ i7).加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。; ^( x& {' |7 m- x
8).再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。9 X; f) N+ L. B* @/ w  |8 V* ?
9).加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置培养箱培养,5小时之后,倒掉培养基,加入PBS洗瓶两次,然后加入胰酶消化,吹打后置于离心机800-1000r/min离心,然后洗一次。置于新的培养瓶里培养,培养体系加入2ml双抗。
8 L  ?& `. l, ~10).24h之后,视情况换液,若仍然污染严重,培养基浑浊,重复以上步骤,若看不到污染物,则继续步骤1)、3)、4)、6)、8),然后加入培养液培养,培养体系加入2ml双抗.
8 j+ @2 O8 i; v0 }$ s11).24h之后,若仍污染严重,可再重复一次,若还污染只能弃之(不过一般没有出现这种情况),若镜下不见污染物,则换液PBS洗瓶,正常培养。  G" b7 Z8 }4 K& _6 E- f3 s8 E
    以上是对于细菌污染(常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌);若为霉菌或者真菌污染,加入两性霉素B清洗和培养,终浓度一般为2.5μg/ml(在30μg/ml时会有细胞毒性)。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同。
, N$ `2 A: n. }$ j希望对你有用。

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包包
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发表于 2019-1-9 13:47 |显示全部帖子
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回复 baoweih 的帖子  U8 `2 [* E: |6 Y

  i  b' e- W: w; |如果污染的话建议放弃样本吧。很难控制。

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包包
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发表于 6 天前 |显示全部帖子
只能抑菌不能除菌,而且细菌量太多也没用的,细胞培养的话污染建议丢弃
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