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用加抗生素的盐水能洗去菌吗 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2018-11-20 16:33 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
请教各位老师,用加了抗生素的培养基培养细胞,如果有菌的话,14天内会死掉吗,还是只是抑制它生长?加抗生素洗涤能洗去吗

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包包
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沙发
发表于 2018-11-21 14:54 |只看该作者
这个还真没试过唉。

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包包
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藤椅
发表于 2018-11-28 14:30 |只看该作者
本帖最后由 阿秀哥 于 2018-11-28 14:31 编辑 ! i& ^1 R( X1 w  j1 V; B* e0 c

, A4 q" @. o  Q3 N; I! f8 y8 D处理细菌污染的重要原则就是:无限地稀释细菌的浓度,无限地减少细菌的数量!
  e8 V; D8 h9 E: _, V8 a, u" h  L0 w1).将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。4 j2 M# S# f) J& T1 E. R
2).继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。
- y# B$ v* x6 ?% t5 q, T; R" g3).继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。; ^2 s- ^  s) y5 S  a# B
4).重复步骤3再洗。
" f9 D$ s2 f2 v! l5).重复步骤3再洗。/ L* y( a7 @, H' X: `
6).加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。
6 r6 ?3 R/ P) Y% l+ J0 M* a5 q- i7).加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。
; F. @/ K: |' _5 G, K. L. G* z' T8).再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。
2 N* ?; {; F' R2 A- g3 c9).加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置培养箱培养,5小时之后,倒掉培养基,加入PBS洗瓶两次,然后加入胰酶消化,吹打后置于离心机800-1000r/min离心,然后洗一次。置于新的培养瓶里培养,培养体系加入2ml双抗。2 k8 ]0 {2 U6 c; D# j. k% I
10).24h之后,视情况换液,若仍然污染严重,培养基浑浊,重复以上步骤,若看不到污染物,则继续步骤1)、3)、4)、6)、8),然后加入培养液培养,培养体系加入2ml双抗.
3 C/ H7 ~! O/ [# R/ Q! ~" Q11).24h之后,若仍污染严重,可再重复一次,若还污染只能弃之(不过一般没有出现这种情况),若镜下不见污染物,则换液PBS洗瓶,正常培养。
  D2 ~# d/ b/ j7 A$ H0 G) S* D    以上是对于细菌污染(常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌);若为霉菌或者真菌污染,加入两性霉素B清洗和培养,终浓度一般为2.5μg/ml(在30μg/ml时会有细胞毒性)。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同。0 B. A7 B6 m# C
希望对你有用。

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包包
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板凳
发表于 2019-1-9 13:47 |只看该作者
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回复 baoweih 的帖子1 {; j% ]; k  \0 l! o2 r% g
+ X" _% u2 s& F
如果污染的话建议放弃样本吧。很难控制。

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包包
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报纸
发表于 2019-1-11 09:59 |只看该作者
只能抑菌不能除菌,而且细菌量太多也没用的,细胞培养的话污染建议丢弃
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