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用加抗生素的盐水能洗去菌吗

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包包
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发表于 2018-11-20 16:33 |显示全部帖子
请教各位老师,用加了抗生素的培养基培养细胞,如果有菌的话,14天内会死掉吗,还是只是抑制它生长?加抗生素洗涤能洗去吗

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包包
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发表于 2018-11-21 14:54 |显示全部帖子
这个还真没试过唉。

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包包
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发表于 2018-11-28 14:30 |显示全部帖子
希瑞干细胞
本帖最后由 阿秀哥 于 2018-11-28 14:31 编辑 $ x2 B: b+ F, W0 X

7 J4 k" b1 U: U6 b处理细菌污染的重要原则就是:无限地稀释细菌的浓度,无限地减少细菌的数量!' J% c8 f( j2 ^: C) z0 F/ v8 F
1).将污染的培养液倒掉,转烧瓶口,加入10mlPBS,适当晃动清洗培养瓶,然后倒掉。转烧瓶口。
0 j3 A: U& i/ Z" Z2).继续加入10mlPBS,同样方法晃动,清洗培养瓶,然后倒掉。
2 ^3 _! M( c4 V. q5 M3).继续加入5mlPBS,同样方法洗瓶,主要是培养面,然后倒掉。
0 E% c6 ^& a  o7 r: R6 c. h$ X4).重复步骤3再洗。" P- k& V- n% |+ r$ |4 h
5).重复步骤3再洗。7 [! e2 m2 L6 o$ j: k
6).加入3-5ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。$ b& s( B3 b/ V
7).加入3ml双抗,洗瓶,静置3-5分钟,然后吸出。
% p7 [  S* D1 X0 h& w9 q" s7 a8).再加入5mlPBS洗瓶,然后吸出。  @3 G6 l3 f  b( r
9).加入10ml培养液,加入2ml双抗,放置培养箱培养,5小时之后,倒掉培养基,加入PBS洗瓶两次,然后加入胰酶消化,吹打后置于离心机800-1000r/min离心,然后洗一次。置于新的培养瓶里培养,培养体系加入2ml双抗。& J: U9 t2 y5 c" l1 }+ q1 O) h
10).24h之后,视情况换液,若仍然污染严重,培养基浑浊,重复以上步骤,若看不到污染物,则继续步骤1)、3)、4)、6)、8),然后加入培养液培养,培养体系加入2ml双抗.. w. w  Q: f4 T7 n
11).24h之后,若仍污染严重,可再重复一次,若还污染只能弃之(不过一般没有出现这种情况),若镜下不见污染物,则换液PBS洗瓶,正常培养。/ O4 E+ _; l$ G, |: u
    以上是对于细菌污染(常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌);若为霉菌或者真菌污染,加入两性霉素B清洗和培养,终浓度一般为2.5μg/ml(在30μg/ml时会有细胞毒性)。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同。
1 p' K" |, {( k4 @" W4 f希望对你有用。

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包包
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发表于 2019-1-9 13:47 |显示全部帖子
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, j$ O( c, h; H
2 A2 x% v% \6 B8 C: [* h' v9 C如果污染的话建议放弃样本吧。很难控制。

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包包
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发表于 2019-1-11 09:59 |显示全部帖子
只能抑菌不能除菌,而且细菌量太多也没用的,细胞培养的话污染建议丢弃
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