用加抗生素的盐水能洗去菌吗

baoweih

请教各位老师，用加了抗生素的培养基培养细胞，如果有菌的话，14天内会死掉吗，还是只是抑制它生长？加抗生素洗涤能洗去吗

保罗闫

这个还真没试过唉。

阿秀哥

8 H  Z! {' L9 x6 w
# z! {" F7 W/ m4 t, Y9 m* y
处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！( R% E( F1 x0 u4 c" c4 h7 Q
1）.将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。( c  q) w' r: C0 o3 i  T
2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。; q, v9 d( z8 z# y, i
3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。5 ]8 h* J) [) z
4）.重复步骤3再洗。
, n* q# v  Q* U. R9 R5）.重复步骤3再洗。
, X! B- f% B: M- k% q- b6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
: F) S" v+ f& L; l3 d3 X7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
! ~4 W8 h# n2 l8 L3 I8 k6 H% d8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。) J% p' X, s6 \. d6 y) J3 X
9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。8 `6 p+ t1 t0 i
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗.2 `" L9 e- @9 {: X  k
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。7 U6 Z$ c& ~6 z/ y6 P: H
    以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同。8 C+ V2 Z; s* x4 P, L, Z# R
希望对你有用。

快乐男孩

回复 baoweih 的帖子
7 F7 T0 s0 k, x+ E) ~- Z  _& A
如果污染的话建议放弃样本吧。很难控制。

没有名字H

只能抑菌不能除菌，而且细菌量太多也没用的，细胞培养的话污染建议丢弃