用加抗生素的盐水能洗去菌吗

baoweih

请教各位老师，用加了抗生素的培养基培养细胞，如果有菌的话，14天内会死掉吗，还是只是抑制它生长？加抗生素洗涤能洗去吗

保罗闫

这个还真没试过唉。

阿秀哥

1 e" B0 N$ v2 R( U: m( @6 r8 G# u! M- ^: Z- q+ b- ^1 S0 E
处理细菌污染的重要原则就是：无限地稀释细菌的浓度，无限地减少细菌的数量！( y* B# O- r* X3 P! e( [$ v( x' a! ^" C
1）.将污染的培养液倒掉，转烧瓶口，加入10mlPBS，适当晃动清洗培养瓶，然后倒掉。转烧瓶口。
! P6 \: Y4 _: `2）.继续加入10mlPBS，同样方法晃动，清洗培养瓶，然后倒掉。
4 h- T, J7 [) B! e& k3）.继续加入5mlPBS，同样方法洗瓶，主要是培养面，然后倒掉。
9 Y& q8 x+ @7 e+ Y4）.重复步骤3再洗。' R8 V$ |/ e4 _9 ?* u: ?1 E/ Y
5）.重复步骤3再洗。3 F, c7 X* t8 ?5 J1 W4 r3 y( a
6）.加入3-5ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
  G) Y( x8 W& ?0 i) O2 f% e1 ]3 e7）.加入3ml双抗，洗瓶，静置3-5分钟，然后吸出。
' D3 c; Y$ f2 O( A% x8）.再加入5mlPBS洗瓶，然后吸出。
) v! F7 Z; \7 y' E5 v9）.加入10ml培养液，加入2ml双抗，放置培养箱培养，5小时之后，倒掉培养基，加入PBS洗瓶两次，然后加入胰酶消化，吹打后置于离心机800-1000r/min离心，然后洗一次。置于新的培养瓶里培养，培养体系加入2ml双抗。& Y0 o+ O8 C' `8 O
10）.24h之后，视情况换液，若仍然污染严重，培养基浑浊，重复以上步骤，若看不到污染物，则继续步骤1)、3）、4）、6）、8），然后加入培养液培养，培养体系加入2ml双抗., ?4 n+ `* d) `- `: S. v
11).24h之后，若仍污染严重，可再重复一次，若还污染只能弃之（不过一般没有出现这种情况），若镜下不见污染物，则换液PBS洗瓶，正常培养。
/ _) I: R4 L0 j    以上是对于细菌污染（常见为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌）；若为霉菌或者真菌污染，加入两性霉素B清洗和培养，终浓度一般为2.5μg/ml（在30μg/ml时会有细胞毒性）。另外也可以选择在培养基里加3ug/ml的制霉菌素或放线菌素D。其它操作同。! A) X" J$ a% ?
希望对你有用。

快乐男孩

回复 baoweih 的帖子1 b( B5 Z8 y# V' L

8 V2 r/ @0 O5 M如果污染的话建议放弃样本吧。很难控制。

没有名字H

只能抑菌不能除菌，而且细菌量太多也没用的，细胞培养的话污染建议丢弃