使用无血清培养基培养MSC细胞时，经常容易出现哪几个错误

友康生物

根据友康生物的客户曾经做过的并且反馈回来的问题，我们给予总结得出以下：
1. 细胞消化的原因
选用胰酶浓度过大及消化时间过长，对细胞造成了损伤，导致传代后，细胞生长不佳的后果。 消化1分钟以内，时间不可过长，至少使用2倍体积的胰酶抑制剂终止消化，离心后，完全去除上清，加入预温的完全培养基重悬。
无血清培养基细胞传代推荐使用温和酶（友康产品，货号：NC1004）替代胰酶，温和酶对细胞损伤小，收获细胞的活率高，传代后扩增倍数能维持较高水平。消化所需时间为2分钟左右，且10分钟内对细胞基本无损伤，无须抑制剂终止消化，仅需5倍体积PBS稀释后，离心去除即可。
2.  细胞融合度问题
有的实验人员习惯让细胞融合度超过了95%，部分区域细胞融合度已达100%，甚至堆叠在一起。
MSC细胞融合度接近100%后，会产生细胞接触抑制，降低细胞活性，致使细胞传代后，生长缓慢或扩增倍数急剧下降。有的实验人员为了节省细胞培养瓶的用量，而让MSC细胞生长过满，是错误的做法。会导致MSC细胞活性受损，下代细胞数量生长速度变慢，衰老增加。反而达不到收获更多细胞的目的。对此建议细胞融合度不可超过80%







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