干细胞上清液无菌条件下浓缩富集探讨！

只因偶然

近期小生在考虑干细胞上清液在实验室无菌条件下进行浓缩富集实验，希望各位大大不吝指教！' e- {8 J8 [( {" |& j
1、高速离心方法
' a/ ]! T0 a: D6 i0 A8 {/ A  r9 u小生试过15000转离心干细胞上清液，发现离心下来的干细胞蛋白成分不多，离心后的上清液中蛋白检测还有不少蛋白，实验效果不成功。关于高速离心法各位大大有更好的意见吗？$ `+ h! D, `7 d
2、膜包过滤浓缩法
, H+ J* e) ~# J8 F# Q小生试过用5KD的膜包过滤浓缩干细胞上清液，不过用膜包过滤浓缩两次后，检测发现过滤废液中还含有不少蛋白，实验效果不成功。关于膜包过滤法各位大大有更好的意见吗？' N4 D9 H* p6 A' Q  [( t
3、真空冷冻干燥法
9 L; c6 H- h/ w4 J9 g" U小生准备试一下真空冷冻干燥法浓缩富集干细胞上清液，不过仪器设备没有选好，没有找到合适的。各位大大有推荐吗？
1 K" Y) ^8 t( o9 J, ?. o5 A* x% h小生的老板比较穷，几千块的实验成本可以考虑一下，过万的成本老板估计是不会答应的。希望各位前辈不吝指教！

lyj-0017

层析或者盐析试过吗？

likun615520

不好意思，不小心鼠标碰到了，不知道咋消除

suoweiyiran0411

你是分离干细胞上清来源的外泌体的吧？一般超高速离心是目前的金标准，膜过滤的话，很多外泌体会破掉，也不纯，还是有很多杂质的，效果也一般，想了解更多，可以去“”外泌体之家”网站学习下，那里有很多干货

只因偶然

回复 lyj-0017 的帖子
' I/ W6 f+ S) v$ v$ B, b1 _5 u
# Q; V, O3 ?! ]5 k层析和盐析处理太过复杂，因为富集后，后续需要应用。

只因偶然

回复 suoweiyiran0411 的帖子4 e% U3 n: s8 m0 [4 O/ z3 N

% D& [( Z) U* U6 t+ H$ ~; [2 n* Y% N, i好的 谢谢