请教肝癌干细胞增殖能力减弱的问题

lanxiang

各位大神，小弟正在做肝癌干细胞的课题，前期通过流式分选已从PLC细胞系中分离出干细胞，并完成了成球、克隆等实验。在实验过程中，我的细胞是分两种培养模式：贴壁和悬浮。在早期培养过程中，贴壁细胞长得非常快，而且经过二次流式分选鉴定，干细胞标志阳性率维持在90%左右。但不久就发现，将新分选的细胞贴壁培养后，增殖能力越来越差，甚至不生长，所有培养系统都没变，就是中途细胞因子和添加剂用完了按照原货号重新购买了。不知各位大神有没有遇到此种情况。