关于流式方面的问题！！

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我的师兄要我做一个脐血的流式，希望各路高手指点一下！！还望具体步骤！！

细胞海洋

最好把你的问题具体一些

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师兄给了我两个抗体，CD34，CD45的，以前看过他做，但是很久了，只是记得他分了三管，一管两个都加了，一管只加了CD45，另一管空白。。

可怜的孩子

你应该是做细胞表面标志吧，抗体是直标的吗？我正好要做，protocol很简单，细胞离心弃上清，PBS重悬，调整细胞浓度为1million/ml，按说明书剂量加入相应抗体（1微克左右），用封闭液稀释至100微升，34、45双标的话，根据说明书，总体积可能要调整，然后上机检测即可。祝好运！

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1  离心: w1 G5 x2 c. z! H$ _
2 悬浮
5 `$ I+ }0 @- n/ v; C8 a! f3 加抗体孵育2 j; g1 D) t. t/ c4 N. y
4 冲洗（pbs）+ A, N$ O" l2 m' g- p* f
5 调整浓度, k7 o: x% A4 u( \8 Z" Q+ ?: a1 }
6 冰盒保存待测. ]6 q6 W0 b2 E8 l) Y* N& }
    祝好运！

157238360jwj

谢谢！！

hawkyiger

首先要确定你是要坐单标还是要做双标，如果两种抗体是不同的荧光标记的话，可以直接双标；如果相同，则需单标。单标很简单，按上面的说的做即可。双标记得设两个补偿管

5784630

首先看你用几种荧光标记啦！

get0715

晕死，这位一看就是新手，大家说的那么概括没什么帮助吧。这个说的有点麻烦，你可以加我qq188684597我跟你仔细说说

Robert-A

注意避光和细胞浓度选择