如何培养干细胞，选择脐带第一条！

友康生物

“为什么没有爬出来原代细胞？”“为什么爬出的原代细胞不多？”“为什么爬出的原代细胞状态不好？”
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出现这些情况时，我们需要从多方面查找原因。想要养出优质的脐带间充质干细胞，首先，就要先选择好脐带。那么该如何选择呢？

一、非常必要的初筛
选取脐带时，一定要确保：
宝妈无乙肝、丙肝、梅毒、AIDS等传染性疾病，无恶性肿瘤及各种遗传性疾病，妊娠期内无严重合并症，无家庭遗传性疾病史；活宝宝，无畸形。

二、将脐带运输至实验室需注意的问题
注：脐带的运输条件，对分离原代MSC细胞的影响较大。
1、4℃环境下运输
运输脐带时，应将脐带浸泡在DPBS或基础培养基里，在4℃环境下运输。如添加抗生素，建议使用庆大霉素（终浓度为25mg/L）。
此处可能会有老师问，“可以使用青链霉素吗？”
出于安全角度，不建议使用青链霉素！因为青霉素致敏性强，容易发生过敏与交叉过敏，而且一旦发生过敏性休克，如果抢救不及时或不当的话很容易导致死亡。
2、应避免通过安检CT机器
运输时应避免通过安检CT机器，例如地铁安检等，会影响干细胞的爬出；也可能导致细胞发生基因突变，存在安全隐患。

三、通过初筛后的脐带样本都适合分离原代细胞吗？
并非所有的脐带都适合做原代分离。
判断脐带是否合适有以下标准：脐带无大范围凝血，为乳白色，未发生水肿等病变，华通氏胶部分含量丰富等。

四、什么样的脐带样本不建议使用？
请慎重选择样本。当样本有以下几种问题时，均属于不良样本，培养结果不可预期，建议弃置：
1、脐带过细的样本。常规脐带直径为1-2cm，过细的脐带很难剥离出合适大小的华通氏胶，甚至剥不出华通氏胶。
2、水肿的脐带。该类脐带很难爬出质量合格的干细胞。
3、严重凝血或被血渗入的脐带。该类脐带能爬出细胞，但血细胞很多，会阻碍干细胞爬出及生长，导致收获原代数量较少。
4、保存时间过久的脐带。保存时间越久，细胞越难爬出（3天以上的脐带建议弃置）
5、保存液内的抗生素含量过高的脐带。保存时，过高的抗生素浓度会抑制干细胞的爬出。
6、经过安检CT机器的脐带。如果脐带通过安检CT机器，例如地铁安检等，会影响干细胞的爬出；也可能导致细胞发生基因突变，存在安全隐患。
7、未被浸润的脐带或华通氏胶。应始终保持脐带及华通氏胶块湿润(可用完全培养基润湿)，否则会影响细胞爬出。