小鼠 ES/iPS 细胞 的无饲养层细胞培养

上海过客

小鼠 ES/iPS 细胞 的无饲养层细胞培养。& U; @: N9 W3 \6 n  e! H5 v

/ E) ^1 ]7 ], `; d8 j. m, G  目的想要获得单独培养的 ES/iPS 细胞。做实验时减少 饲养层细胞的影响。1 {6 n/ q, D3 o8 G$ {

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9 U! [! F5 [) Q  b6 t4 J在小鼠胚胎操作实验指南 中文版 ，P276有 一个 明胶训练的方法 来纯化ES细胞。我觉得还可以。  这样纯化ES细胞就可以用来做其他实验了。
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- H5 ?% b6 i1 Q, s  这样的方法 不知道有没有单独的实验方法 或者论文呢 ？
7 @6 @( F, E+ J3 o- X: S) X8 R. D2 D7 ~1 ^5 ]' N8 s5 Q
有 知道的  请提供 一下 。或者  知道关键词是什么 也请告诉我

ppcl2

用明胶铺过的培养皿，培养ES细胞一到两代，基本上饲养层细胞就可忽略不计了。

cony

也可以采用差速贴壁法减少饲养层细胞的影响。

yibo10679

用明胶铺被，传3-4代就几乎没有饲养层细胞了，当然了差速贴壁的方式也可以尝试

上海过客

现在在用 差速贴壁的方法

afei198520

用差速贴壁的方法吧 # \1 v% r0 l, I- R: ?7 N
一个小时左右的时间就能分开了

mayiwaiwai

回复 afei198520 的帖子0 q  N" u+ o+ W6 s) t; K8 _  ?
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能给出差速贴壁方法的具体步骤吗？请教，没有做过这个哎，不胜感激

yedanna

我用histopaque-1119做的梯度离心，分离效果很理想，基本无饲养层细胞。

bibottll

回复 mayiwaiwai 的帖子. Z+ U* ]# Y& z% q' ~* M

* v8 a" Q2 [. m& c# P$ `/ ^$ g! I明胶铺板放在培养箱半个小时以上，然后把细胞悬液接在上面，培养箱培养一个小时，饲养层基本就贴壁了