关于脐带间充质干细胞的培养问题

weianh

请教下：我曾用酶消化过脐带，是消化过夜的，但是第二天发现特别粘，都没办法过滤，楼上的也是这种情况吗，怎么克服的？谢谢

chuanbaozang

可以用DNase处理一下，这样可以降低其粘稠度，还让细胞团更分散成单个的细胞。我们处理过其他的细胞，效果不错。

zhanglixin522

是的，特别粘稠是因为细胞破碎时释放的DNA缠绕在一起了，用适量浓度的DNASE就可以把DNA消化一下，缓解粘稠状态！另一方面，你在消化的时候可采用动态消化，就是使消化的组织摇动起来，有助于消化分散。

weianh

可以问下你们的DNase是从哪定的吗，浓度多少，我们这里有takara的，处理过神经，效果不好

wuxiao101325

还有一种方法就是根本就不过滤，直接接种到培养皿里面，我们做过对照试验，过滤的比未过滤的生长状态差

wuxiao101325

还有就是三楼的最后一条建议不错，我们是在恒温振荡摇床里消化的，效果比静置消化好很多

香瓜瓜

还可以尝试用PBS等量稀释以后再过滤，效果有没有DNase好不确定，可以一试。
" S. P- A2 y) H顺便问一下上面的战友，DNase浓度大概多少呢？
' T- a5 X( V- E0 x4 R
- \: N2 D* z4 ]) V+ u还有，LZ已经是最高楼了，没有在楼主楼上的了，LZ一句楼上的让我蒙了半天，呵呵。

weianh

决定再试试，谢谢各位的建议
  p. b8 h/ z: Q$ t1 }+ @5 [& K
4 S3 Q( F% A/ t- M3 S" m: n是版主把这个帖子给分割出来了

xiegm

过滤会损失大量细胞，还是不过滤的好

viva

学习了。做了一次，不但过滤而且离心，感觉剩下细胞太少。再做次不过滤的试试