人脂肪干细胞分离培养及向成骨分化

decloud2009

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% |* X6 v! Q, A; B- B# m5 q) }% _目的　探讨在成骨诱导条件下人脂肪干细胞( adipose derived stem cells,ASCs)的体外诱导分化情况。方法
$ ?$ z! h- f' i. O　脂肪组织来自整形外科吸脂者,以Ⅰ型胶原酶消化抽吸物分离其中脂肪细胞,体外培养并测定第一、二、三代细胞增殖3 Z  p% J% u. _* F9 R* h* @5 k7 ~
速率,绘制细胞生长曲线,计算群体倍增时间。流式细胞仪检测抗原CD105、CD106、CD166、CD29、CD49d、CD34、CD31,
1 U; b  T: v/ M% z" E5 R分析酶消化法获得的细胞分别向成骨、成脂定向诱导,明确其分化能力。结果　第一、二、三代细胞生长稳定,群体倍增
! v! Z0 N) p/ N" Q3 P时间约60 h。流式细胞仪检测显示,干细胞相关抗原CD105、CD106、CD166、CD29表达率均> 60% ,但与造血系统相关抗
: x/ C3 ^! r1 Y% Q. ~4 y- t5 J2 G原CD34和与内皮细胞相关抗原CD31的表达率分别为7. 1%和28. 7%。向成骨细胞诱导可见矿化结节形成,免疫荧光
( X9 Y# \8 M; e5 t" O) P5 N检测显示骨唾液酸蛋白( bone sialop rotein, BSP) 、骨桥蛋白(osteopontin, OPN) 、骨连接蛋白(osteonectin, ON)表达;向成
/ j2 b- R6 ]/ Y! O8 K5 y; m脂肪细胞诱导可见脂滴形成。结论　脂肪干细胞体外增殖能力强,来源充足,细胞获得量大,可能成为骨组织工程的种/ i. _% S; Y. }  U+ d2 _3 o) L. I
子细胞的来源。

afei198520

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