求助 跨内含子的 Real-time 的引物设计问题 ，最后有一个流程

上海过客

求助 跨内含子的  Real-time 的引物设计问题 ，最后有一个流程。9 A7 N! |/ ]$ J; e, J
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不是太懂 ，尤其下游需要翻转的 就比较麻烦一点 。& @$ M  Y3 T( ?8 n5 q: e

- q( d! F7 m9 h6 Y. B; M我的想法是   先使用软件设计出 引物 后 ，在 基因组里搜索  两个引物的位置 是不是在 两个外显子 上 。  这样的方法不知道可不可以

上海过客

其实也是做oCT 3/4,nanog ,sox2 的  表达   量分析 。) e" d1 L' Q- c" s  H
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欢迎大家多提建议

zhangwwcell

楼主说的方法应该是可以的。

ambassador

你是用探针法还是用染料法呢？
  C: F/ C0 K4 Q0 v  I2 h其实染料法的话，就是注意扩增片段在80-200之间，TM值设置为60，一定要注意不能有发夹结构和特异性！