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骑士

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发表于 2009-2-28 08:12 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

为了探讨应用RNA干扰技术抑制Hep-2细胞人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因对C-myc蛋白表达的影响。研究者根据hTERT cDNA序列构建表达hTERT mRNA特异的、含荧光素基因的shRNA真核表达质粒pshRNA1，随机选取一段与人类基因无同源性的碱基序列构建表达shRNA的含荧光素基因的对照质粒pshRNA2，采用METAFECTENE作为转染试剂。分别以质粒pshRNA1、pshRNA2及空白培养液处理喉癌Hep-2细胞.应用RT-PCR法检测hTERT基因的表达，Western Blot法检测hTERT和C-myc蛋白表达水平。结果质粒pshRNA1转染组hTERT mRNA及蛋白表达水平显著低于其他处理组及空白对照组(P＜0.05)；质粒pshRNA1转染组C-myc蛋白表达水平显著高于其他处理组及空白对照组(P＜0.01)。可见RNA干扰抑制人端粒酶逆转录酶活性使喉癌Hep-2细胞C-myc蛋白表达升高，其确切的机制有待进一步研究。

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