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作者:Schnabl B, Choi YH, Olsen JC, Hagedorn CH, Brenner DA.
, I1 B! k& L& k3 ZDepartments of Medicine (BS, JCO, DAB) and Biochemistry and Biophysics (BS, DAB), University of North Carolina at Chapel Hill, Chapel Hill, North Carolina. 0 [7 l+ s& H# U& I1 d
: Q, @4 |5 {% f; @摘要:端粒的长短控制细胞是否进入衰老阶段。端粒酶催化亚基(人端粒酶逆转录酶hTERT)发挥功能,稳定端粒的长度,延长各种人类细胞的生命。我们的目标就是评估端粒酶的活性作用,以及在调节活性人星状肝细胞(HSCs)增殖时,端粒的维持作用,建立长生不老的人HSCs细胞系。人HSCs细胞来源于外科正常人类肝脏样本,感染了能表达hTERT的逆转录酶病毒。HTERT的异常表达使端粒酶活性得到再生,维持了人HSCs细胞的端粒长度。无论是否被含有新霉素的反转录酶载体感染,受控的人HSCs细胞端粒酶活性无法检测,端粒缩短也不明显。经历了9-15次传代和衰老过程之后,这些端粒酶无活性的HSCs细胞进入了不分化阶段。相反,端粒酶有活性的HSCs细胞至今已经传了69代,没有发生癌变,表达出正常活性HSCs细胞的形态和功能。基因芯片和RT-PCR分析,端粒酶有活性的HSCs细胞内,mRNA的表达模式与人类HSCs细胞相似。将这些端粒酶有活性的HSCs细胞移植到膜样矩阵上,使他们向更静止的表形转变。总结而言,活性人类HSCs细胞被hTERT感染后,变得长生不老,并能保持活性。新开发的细胞系是研究人类HSCs细胞的细胞生物学特点的有力工具。 |
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