11755名中国北方汉族造血干细胞供者HLAA、B、DRB1基因和单倍型研究 - 国内文献区干细胞之家



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发表于 2009-3-3 12:02 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

作者：吴强驹  刘孟黎  齐珺  刘晟  张艳  韦小谦作者单位：陕西省血液中心，  西安  710061 - ?% \+ j8 J$ p9 k: ~' u, V




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                  7 V% m1 o; ]7 O$ q; p
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      . Y9 K* N: l2 _: k( w

      【摘要】  　　为了研究中国北方汉族造血干细胞供者的人类白细胞抗原(HLA)A,B,DRB1等位基因、HLA单倍型频率及其连锁不平衡特征，采用PCRSSP和PCRSSO流式微磁珠检测方法对中华骨髓库陕西分库内11 755名中国北方汉族骨髓供者进行HLA基因低分辨分型，并根据HLA表型群体资料，运用基于最大数学预期值算法（ExpectationMaximization, EM）的计算机软件Arleguin计算HLA单倍型频率。结果表明： 11 755例样本符合HardyWeinberg平衡检验，共检出HLAA、B、DRB1等位基因(按分解抗原统计)分别为18、42、15种，包括很少在汉族人群中检测到的HLAA25、B42、B53、B73和DR3，未发现HLAA36, A43, A80, B78, B82和DR18等6种特异性。HLAA*02, A*11, A*24, A*33, A*30, A*01, A*03, A*13, B62, B*51, B*46, B60, B61, B*35, B*44, DRB1*15, DRB1*09, DRB1*04, DRB1*07, DRB1*12, DRB1*11, DRB1*14, DRB1*08, DRB1*13的频率＞0.05。EM法计算求得频率＞10-6的HLAABDR单倍型共计2 026种，其中HLAA30B13DR7、A2B46DR9、A33B58DR17等26种单倍型频率＞0.005，A30B13DR7是中国北方汉族最常见单倍型。计算求得的HLAAB、ADR、BDR单倍型共计538、227、522种，频率＞10-6者分别有409、195、423种，其中A30B13, A2B46, A33B58等28种单倍型频率＞0.01；A2DR9, A2DR15, A30DR7等26种单倍型频率＞0.01；B13DR7, B46DR9,B13DR12等24种单倍型频率＞0.01。具有统计学意义（P＜0.05）的连锁不平衡HLAAB、ADR和BDR单倍型分别有296种（72%）、130种（67%）和308种（73%），其中A30B13、A33B58、A1B37、A30DR7、A33DR13、A1DR10、B37DR10、B8DR17、B13DR7、B58DR17等单倍型表现为显著的正连锁不平衡。结论：本研究使用EM算法获得了目前中国北方汉族样本量最大的HLAA/B/DRB1等位基因多态性、单倍型频率分布及连锁不平衡的特征，这将有助于临床为患者寻找合适供者，为移植免疫、HLA与疾病相关性及本地区群体遗传学等方面的研究提供了重要依据。
      【关键词】HLA；北方汉族；单倍型；基因频率；连锁不平衡；基因多态性；造血干细胞4 C& y: V& B) t, d. _8 }
   　　Gene and Haplotype Frequencies for the Loci HLAA, B and DRB1 in 11755 North Chinese Han Bone Marrow Registry Donors6 I( J) Q: q/ i' K& F% q

WU QiangJu,LIU MengLi, QI Jun, LIU Sheng, ZHANG Yan, WEI XiaoQian
6 {7 X/ ^0 m  v% O# e
Blood Center of Shanxi Province, Xi'an 710061, China& a! z  W; H' M: Q
5 Q% b1 q$ @- P* C1 U6 }
AbstractThe study was aimed toinvestigate the human leukocyte antigen (HLA)A,B,DRB1 alleles and haplotype frequencies and the characteristics of linkage disequilibrium in north Chinese Han bone marrow donors. HLA phenotype data of 11 755 north Chinese Han bone marrow donors were identified byPCRSSP and PCRSSO. HLAA,B,DRB1 allele and haplotype frequencies were calculated by computer software named Arleguin which was based on ExpectationMaximization(EM) algorithms. The results showed that the population of 11755 unrelateddonors was tested by HardyWeinberg equilibrium, and 18,42 and 15 specificities ofHLA alleles were identified on the HLAA,B,DRB1 locus respectively, including HLAA25、B42、B53、B73 and DR3 which were rarely reported in Han population. HLAA36, A43, A80, B78, B82 and DR18 were not detected inthis study. The most frequent alleles with a frequency of over 0.05 were HLAA*02, A*11, A*24, A*33, A*30, A*01, A*03, A*13, B62, B*51, B*46, B60, B61, B*35, B*44, DRB1*15, DRB1*09, DRB1*04, DRB1*07, DRB1*12, DRB1*11, DRB1*14, DRB1*08, DRB1*13. There were a total of 2 026 kinds of HLAABDR haplotypes (with a frequency of over 10-6) to beobtained. The each frequency of 26 kinds of threelocus haplotypes including HLAA30B13DR7, A2B46DR9, A33B58DR17 etc was higher than 0.005. A30B13DR7 was the most frequent haplotype in north Chinese Han population. There were a total of 538 kinds of haplotypes for HLAAB, 227 kinds for ADR and 522 kinds for BDR to be obtained,and there were 409, 195, 423 kinds of haplotypes respectively with a frequency higher than 106. There were 28 kinds of HLAAB haplotypes including A30B13, A2B46, A33B58 etc, 26 kinds of HLAADR haplotypes including A2DR9, A2DR15, A30DR7 etc, and 24 kinds of HLABDR haplotypes including B13DR7, B46DR9,B13DR12 etc with a frequency higher than 0.01. 296 (72%) kinds of HLAAB, 130 (67%) kinds of ADR and 308 (73%) kinds of BDR haplotypes were statistical linkage disequilibrium. HLAA30B13、A33B58、A1B37、A30DR7、A33DR13、A1DR10、B37DR10、B8DR17、B13DR7、B58DR17 were significant positive linkage disequilibrium. It is concluded thatthis HLAA,B,DRB1 gene and haplotype frequencies and linkage disequilibrium data with the largest sample size up to now is unique in north Chinese Han population. The study will be helpfulto find matched donors for patients and establish the important foundation for further studying of transplantation immunity, HLArelated diseases and population genetics of this area./ V4 ?# S, R1 ]  i
/ u/ p( `; L' z8 A! L
Key wordsHLA; north China Han population; haplotype; gene frequency;linkage disequilibrium; gene polymorphism; hematopoietic stem cell5 o( z+ K9 F7 l- Q; P4 i/ _

J Exp Hematol 2007; 15(2):357-363: [+ `% W8 a. y$ }! ?9 w$ }

HLA是人体调控特异性免疫应答反应和决定病原体或疾病易感性个体差异的主要基因系统，具有高度多态性和显著的人种、民族、地域差异。HLA配型是否相合以及相合程度已成为同种异基因造血干细胞移植成功与否的关键因素之一。找到HLA相合非亲缘供者的机率取决于受者的HLA表型、供者群体种族背景即HLA表型分布和骨髓库供者数量［1］。通过受者所在群体的HLAA,B,DRB1单倍型频率可以计算出找到HLA匹配供者的机会，同时也可以对骨髓库规模进行评估［2，3］。目前有关中国人群HLA分布的资料多数样本量较小，从大样本中估算中国北方汉族人群HLA三座位单倍型频率，目前国内尚未见到报道。我们采用PCRSSP和PCRSSO流式微磁珠检测技术，对中国造血干细胞捐献者资料库陕西分库内11 755名北方供者进行HLAA、B、DRB1基因低分辨分型，并根据表型资料使用最大数学预期值算法（Expectationmaximization, EM）计算HLA三座位单倍型频率，取得了目前我国北方汉族样本量最大的HLA基因分布频率及双座位和三座位单倍型频率资料，为我们研究HLA与移植免疫、个体识别、疾病相关性、种族演化迁徙规律等方面提供了基础资料。8 D1 ~# [3 J( A8 s, R# ?& V

材料和方法7 v: W- i( e9 T* @" {5 q
- G. t9 A3 B9 J2 t! {
样本来源, o: m% X% g1 k0 }. n/ e

以北纬34°秦岭淮河一线为中国南北分界线，收集2002-2005年陕西血液分库汉族骨髓供者，共计11 755名个体构成中国北方汉族群体资料，供者年龄18-45岁。
% J+ j! n% f+ k0 ^
主要试剂
9 [* }& v6 `4 u( C/ q6 q5 O
DNA快速抽提试剂盒由美国PelFreez公司提供。PCRSSP基因分型试剂由美国PelFreez公司提供。PCRSSO Luminex分型试剂由美国One Lambda公司提供。
& M  Q1 l% l6 O- ^) M& E# Y% U
主要仪器
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核酸检测仪为Biochrom公司产品，9700 PCR扩增仪为PE公司产品，电泳仪为英国ABgene公司产品，凝胶成相系统（UVP），流式微磁珠分析仪为Luminex公司产品。; D/ ^' m* m! q! z
( G6 x, g/ S5 ~9 Y
实验方法) V% a# U, X' f. {$ O2 r& R

对11 755例样本取500 μl EDTA抗凝全血提取DNA，检测DNA浓度为40-100 ng/μl，AD260/280比值为1.6-1.8。采用PCRSSP和PCRSSO流式磁珠分型方法，PCR反应扩增条件、HLA分型结果判读按照试剂盒说明书操作，对于分型结果有疑问的样本，用与原分型试剂不同批号或不同厂家的试剂进行复试。HLA分型质控试验由随机抽取的5%样品复试。" H' X* q+ d9 E, c* h7 _5 n
- T+ e7 y0 Y: ], ]' y
HLA基因命名9 a$ L( Y' v, `% K

HLA基因命名均按WHO正式认可的命名，为了便于估计群体资料的单倍型频率，以及今后根据群体资料估算临床受者HLA匹配概率和骨髓库最小群体数量，HLA基因分型结果均依照2004年HLA命名字典翻译为HLA 抗原特异性［4］。) y8 ?; |! o0 D6 f( M/ k& j
1 a5 m7 n5 C; R0 Q: I% {% K" T
统计学分析

基因频率计算对HLA抗原的低分辨基因分型，在不存在空白基因的情况下，如果只检出1个基因，表示为纯合子。HLA基因频率(GF)采用直接计数法计数。

HLA单倍型频率采用EM法估计HLA双座位和三座位单倍型频率，具体运算使用Arleguin计算机软件［5］，其最大重复计算次数设为9 999次循环。5 A" L+ w+ I8 x+ p
% x3 V) G$ I& f" t
HardyWeinberg平衡检验采用χ2检验，以确定资料为孟德尔式群体资料的可靠性。8 D! M8 B/ S, t# ~8 n
& s! I; X4 J# t# X( K
连锁不平衡参数按照文献［6］方法计算连锁不平衡参数，包括绝对Δ值（A.L.D）、最大Δ值（M.L.D）和相对Δ值（R.L.D），R.L.D与0之间的可信度采用四格表卡方检验。三座位连锁不平衡参数（Δijk）采用下列公式求得。+ J; O( I/ o3 V; Q6 h2 e+ s* U

Δijk=HFijk-GFiGFjGFk-GFiΔjk-GFjΔik-GFkΔij

R.L.Dijk=Δijk/Δijk最大值, G6 v2 J/ k& l: C" z
& f4 X7 u- u1 Z5 c% h
当Δijk＞0时，Δijk最大值=Δijk GF-HGijk (GF为i, j, k中最小基因频率)$ O6 e$ ~$ c) H

当Δijk＜0时，Δijk最大值=Δijk-HFijk6 u) a" N9 K- K; n( z
4 @7 a# h7 M1 y8 p& x; d
结果# T9 y  \0 X  |1 f% s$ Y: P4 n
2 y$ r& o* M: z9 |3 w! K
HLAA、B、DRB1基因分布符合HW平衡定律(P>0.05)，确保了研究结果的可靠性。11 755名中国北方汉族骨髓供者中，总共检测出75种HLA特异性，每种特异性对应的HLAA、B、DRB1等位基因频率见表1。A、B、DRB1各座位排名前4位的分别是A*02、A*11、A*24、A*33、B*13、B*1501组(B62)、B*51、B*46、DRB1*15、DRB1*09、DRB1*04、DRB1*07。与以往国内群体调查资料［7］相比，较少报道的HLAA25、A74，在本研究资料显示分别有12和7例；HLAB42、B53、B73分别检测到4、5和6例；HLADR3检测到3例。在被调查人群中，未发现HLAA36、A43、A80、B78、B82和DR18等6种特异性。每个座位上的等位基因频率的分布情况见表2。从表2可见A座位上检测出18个等位基因，其中12个等位基因频率之和超过99%。在B座位的42个等位基因中，22个等位基因频率之和达到95%。结果表明，中国北方汉族人群中HLAA和B等位基因的分布相对比较集中。3 W/ l; w5 r$ e& U. {: Z. T  a

因单倍型数据篇幅较大，这里仅列出50种最常见的HLA三座位和双座位单倍型（表3），其频率的分布状况见表4。结果显示，EM 法计算求得的HLA三座位单倍型共计有4 630种，其频率＞10-6者有2 026种，其中876种单倍型（约占总数的43%）在本研究群体中最多出现过1次，其频率在0.000001～0.000099之间，累计频率约为4.73%。表3所示的50种最常见三座位单倍型仅占单倍型总数的2.5%，但其累计频率高达34%。EM法计算获得HLAAB、ADR、BDR单倍型共计538、227、522种，频率＞10-6者分别有409、195、423种，频率者分别有131种（32%）、115种（59%）和166种（39%），其累积频率分别高达91.92%、97.36%和92.18%。由此可见，中国北方汉族人群在单倍型的分布上同样呈现相对集中趋势。而中国北方汉族骨髓供者中最常见的HLA单倍型是A30B13DR7、A30B13、A2DR9和B13DR7，其频率明显高于同类其它单倍型。/ s4 {7 |! t9 p3 m% y: w+ E
1 X7 t3 a  c+ z% g) P5 F7 J6 ^* Y
11 755例北方汉族骨髓供者中经计算求得的2 026种HLAABDR单倍型、409种AB单倍型、195种ADR单倍型和423种BDR单倍型，分别为单倍型理论值的17.87%、54.10%、72.22%和67.14%，提示中国北方汉族群体中HLAA,B,DRB1等位基因间存在显著连锁不平衡。属正连锁不平衡（A.L.D＞0）的HLAAB、 ADR和BDR单倍型分别有162、93、157种。因A.L.D之间缺少可比性，所以根据R.L.D，表5列出了前25种强连锁不平衡双座位单倍型，其中HLAAB和BDR单倍型的R.L.D均＞0.35，ADR单倍型的R.L.D均＞0.15。 HLAA30B42的R.L.D高达1，A30B64, A30B13, A34B15, B63DR13, B8DR17, B64DR4的R.L.D均达0.8以上。另外，表3中列出三座位连锁不平衡参数，曾有报道认为表格法不能科学反映HLAA,B,DRB1三个基因座位在染色体上的线性排列［8］，这里仅供读者参考。

讨论

准确的HLA三座位单倍型频率是由受者HLA表型资料估计其找到HLA匹配供者的机率以及评价骨髓库最适大小的核心数据，同时也被广泛用于种族地域间遗传学差异以及亲子关系的研究中。本研究取得了目前中国北方汉族人群样本量最大的资料，采用了可靠的基因分型技术进行HLA分型，使用了由瑞典研发的Arleguin计算机软件运行的目前最为精确的EM算法计算HLA双/三座位单倍型频率，这三方面因素确保了本研究获得的HLA单倍型频率资料的可靠性和科学性。1 Z) |" u' H8 m& z2 m, I
" |3 u3 F9 [. Y3 [
我们在HLA基因分型中鉴定了75种HLA特异性，发现A*02、A*11、A*24、A*33、A*30、B*13、B*15(62)、B*51、B*46、B*40(60)、B*40(61)、B*35、B*44、DRB1*15、DRB1*09、DRB1*04、DRB1*07、DRB1*12在中国北方汉族人群中有较高的频率分布，分别占到HLAA、B、DRB1座位等位基因频率的77.17%、57.21%和63.15%，与其他报道［9］基本一致。国人较少报道的HLAA25，本资料显示有12例(0.00051)；HLAB42,B53,B73分别检测到4例(0.00017)，5例(0.00021)和6例(0.00026)；HLADR3检测到3例(0.00013)，尽管在群体中其基因频率非常低，但随着库容量的扩大也不容忽视。与以往国内代表南方汉族的相应资料［7，10］比较，本研究结果也显示出北方汉族人群所带有的相对较高频率的抗原，如A1, A3, A30, A32, B7, B35, B44, B51, B57, B61, B62以及DR7。本研究未检测到的HLAA36, A43, A80, B78, B82和DR18等6种特异性，这一方面与样本量有关，另一方面这些带有黑人种族地域特征的基因可能在中国人中的分布频率极低。. f( F4 h8 F7 G, C6 Y: }" l6 A
3 t8 M& g5 }$ x9 |! l1 D. ?
本研究显示，常见的HLA三座位单倍型是由A、B、DR座位上的高频等位基因组成，如A30B13DR7、A2B46DR9、A33B58DR17、A2B13DR12、A2B46DR8等。但单倍型频率的排序与各座位等位基因频率的排序并无相关性，甚至某些频率较低的等位基因构成的三座位单倍型却不低，如B*37和B*57的基因频率均＜0.02，但A1B37DR10和A1B57DR7单倍型频率却排列前50位。参照表5，这种现象也恰好说明了HLA不同座位等位基因之间的连锁不平衡关系。与代表中国南方汉族人群的四川［7］、江西［11］及台湾人群［12］的单倍型研究比较，南方汉族以A2B46DR9为最常见三座位单倍型。此外，A11B13DR15、A11B75DR12、A11B60DR4、A11B60DR8等单倍型频率明显高于本研究。本研究显示，北方汉族群体则以 A30B13DR7为最常见单倍型，此外A2B13DR12、A33B44DR13、A2B61DR9、A1B37DR10等单倍型频率显著高于南方汉族。 A33B58DR13、A33B58DR17和A11B62DR4等单倍型在中国南、北方汉族人群中频率均较高。
2 j* f, K1 ^8 H
从HLA双座位单倍型频率分布上看，本研究显示常见的主要为A30B13、A2B46、A33B58、A2DR9、A2DR15、A30DR7、B13DR7、B46DR9、B13DR12等，与常见三座位单倍型频率分布基本吻合。这一结果提示，携带这些常见单倍型的患者更容易从北方汉族人群中找到HLA匹配的骨髓供者。7 p4 I# V6 y8 w# R- C, z! |' ^
5 L/ k; `) D: r
在自然选择作用下，连锁不平衡现象在HLA区内各座位等位基因之间普遍存在。本研究显示，因不存在或是频率非常接近于0，尚有82.13%的HLAABDR单倍型、45.90%的AB单倍型、27.78%的ADR单倍型和32.86%的BDR单倍型没有观察到。这提示我们，除了选择优势外，可能与某些疾病的易感性及保护性或者二者中和作用相关联。连锁不平衡分析结果显示，在409条HLAAB单倍型、195条ADR单倍型和423条BDR单倍型中，具有统计学意义（P＜0.05）的连锁不平衡单倍型分别有296条（72%）、130条（67%）和308条（73%），其中A30B13、A33B58、A1B37、A30DR7、A33DR13、A1DR10、B37DR10、B8DR17、B13DR7、B58DR17等单倍型表现为显著的正连锁不平衡。从表5中还可以看出，HLAA座位与DR座位间的连锁不平衡关系弱于AB座位间以及BDR座位间，而常见HLA三座位单倍型基因间的连锁性更大程度上取决于AB和BDR基因间的连锁关系。另外，从表3可见，某些高频双座位单倍型的R.L.D＜0，表现为负连锁不平衡，如A2B13和A11B46的R.L.D分别为0.35和0.30，是否由于B13DR12和B46DR9的单倍型频率很高，且呈正连锁不平衡，通过"矫枉过正"，使得三座位单倍型A2B13DR12和A11B46DR9的频率依然保持较高水平？这有待于进一步探讨。

总之，随着造血干细胞移植和器官移植技术的快速发展更新，越来越多的资料显示供受者HLA匹配对于降低移植物抗宿主病(GVHD)及移植相关毒性(TRM)、提高受者长期存活率等有着不可低估的作用［13,14］。本研究分析了中国北方汉族最大样本量的HLAA/B/DRB1等位基因多态性、单倍型频率分布及连锁不平衡的特征，为评价骨髓库容量对患者查询的满足程度、骨髓库最适大小、与患者匹配几率以及HLA多态性与移植免疫相关性等研究提供了重要依据。- ~8 ~' a' f; v+ a. T
      【参考文献】+ B& D! k' W' S% ?% P
1赵桐茂. 寻找HLA匹配无关供者概率曲线的计算及其应用. 中国输血杂志，2003；16：381-384.
+ X1 _! u" m" ^7 _
/ a* E) Y! M7 b8 h/ }4 K

2Muller CR, Ehninger G, Goldmann SF. Gene and haplotype frequencies for the loci HLAA, HLAB, and HLADR based on over 13,000 German blood donors. Hum Immunol, 2003； 64:137-151
' j2 I" w" {4 A$ U

3Hurley CK, Fernandez Vina M, Setterholm M. Maximizing optimal hematopoietic stem cell donor selection from registries of unrelated adult volunteers. Tissue Antigens, 2003； 61:415-4249 H. t+ d) b/ U

  d/ {$ Q% k, S" y" ]6 |

4Marsh SG, Albert ED, Bodmer WF, et al. Nomenclature for factors of the HLA system, 2004. Tissue Antigens, 2005; 65:301-369

5Schneider S, Roessli D, Excoffier L.  Arlequin ver.2.000: A software for population genetics data analysis. Genetics and Biometry Laboratory, University of Geneva, Switzerland. 2000- ?! k5 V3 ?4 c& w% m1 ~6 \7 C% f. ^. @
# w: U/ l" m7 N4 B; _

6 ^. k* X; D; C+ u( O! N
6赵桐茂. 人类血性遗传学. 北京：科学出版社，1987：252-2575 @3 ^2 D$ C( o3 e+ h0 h  {0 ?) {
5 M+ h& y+ R/ m
8 z/ Z$ j! c! A% C0 Y. p' O5 F
4 I9 J9 g2 Z* C5 v6 x
7曾洁，王憬惺，孙水仙等. 四川造血干细胞捐献者资料库HLAA,B,DRB1基因和单倍型研究.中国输血杂志,2005,18:384-388
0 {! O- j( F& `. X0 a2 A

8Nijenhuis LE, D'Amarco J. Threelocus haplotype interactions in the analysis of linkage disequilibrium. Tissue Antigens, 1985,26:215-216

( j, |6 k% u1 e, F4 }) b* b; g; l
9吴国光，邓志辉，高素青等. 6965名汉族骨髓供者HLA多态性分析. 中华血液学杂志，2004；25：473-477

, I' @  `( h( l  G& u4 I  l
+ a/ E5 g! d. G  z
10张工梁，杨颖，冯吉吉等.  中华（上海）骨髓库的HLA分布报告.中华器官移植杂志，2001；22：179-1820 Z% @6 ~! }" j+ E' G

# z1 C& i6 w4 K  \: n+ v! i

11程良红，吴国光，李兴茂等. 2210例江西籍汉族骨髓供者的HLAA、B、DRB1等位基因和单倍型频率. 临床输血与检验，2006； 8：5-12

12Shaw CK, Chen LL, Lee A, et al. Distribution of HLA gene and haplotype frequencies in Taiwan: a comparative study among Minnan, Hakka, Aborigines and Mailand Chinese. Tissue Antigen, 1999; 53:51-64
& V, x) ~1 H0 b' O: Y, Y' k
4 Y) V$ K: m; E$ S& Y3 G% w

13Ottinger HD, Ferencik S, Beelen DW, et al. Hematopoietic stem cel transplantation: contrasting the outcome of transplantations from HLAidentical siblings, partially HLAmismatched related donors, and HLAmatched unrelated donors. Blood, 2003; 102:1131-1137, S  o0 q$ Z' D6 w' u

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14梁彬，黄河，蔡真等. HLA基因位点全相合和1-2个位点不合无血缘关系异基因骨髓移植的临床疗效比较.

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