大家讨论一下Epiblast Stem Cell的问题

张也行

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  Z3 t: L; }! O: ]5 {" j2 ]最近看了一些EpiSC的文献，很有意思。所以想和大家讨论一下。
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1. 大家所在的实验室分过Epiblast吗？什么动物的？是否容易？是按照什么样的protocol分的？欢迎大家附上protocols，加分大大的哦！, c+ f; T8 R0 |" {  e

* U6 ~: a6 r" ~) M$ N2. EpiSC 和 ESC：他们的关系是怎样的：是多能性的两种不同的状态，还是EpiSC是由ESC分化而来的？ 也欢迎大家讨论的时候把你的论据的链接地址或文献附上，也有加分哦！7 V5 E2 s+ [- \- f7 z+ U! o

6 {* P6 g; n3 D$ {& D先讨论这两个话题，如果大家感兴趣，以后再深入讨论一下其他更深层次的问题。

zhenhua

不是很清楚哦，LZ不是看了一些文献吗？附上可以吗？

FYH

欢迎大家把文献附上，一块讨论

张也行

好的，最初EpiSC的两篇文献下载地址：http://www.stemcell8.cn/viewthre ... ;highlight=Epiblast

juan880929

将ES放在EpiSC的培养基中就会使ES分化为EpiSC，将EpiSC放在ES（2i）培养基中也能使EpiSC转化为ES，但是前者较容易。ES和EpiSC是两种不同的干细胞系，相对于ES来说，EpiSC的干性更低一点。两者都能分化为三胚层，但是EpiSC不能像ES一样得到嵌合体。EpiSc应该是ES分化的后一阶段。

lixiaodong

Good topic。

张也行

回复 5# juan880929
* e$ |8 a9 a; E关于EpiSC的嵌合体问题，并不是说他不能形成，而是目前是吧EpiSC导入到pre-implantation的囊胚中，但是ICM中的细胞是依赖于LIF通路维持，而EPiSC是依赖Actvin/Nodal通路维持，所以根本没法整合，而不是说EpiSC的多能性更低。

张也行

回复 5# juan880929
; b6 k# O( q5 ?$ V7 S7 M/ H! O" z; f1 S$ m: s
不知道您的实验室有没有分过EpiSC啊？用的什么动物？

bardey

epiBlast stem cell最早是在小鼠的早期胚胎中分离出来的,所谓epiBlast中文可以译为"上胚层",它与hypoblast"下胚层"相对,hypoblast在小鼠中常常用"primitive endoderm"待替.上述叫发都是人为定义的,从胚胎发育角度来看,epiblast的阶段在ICM(inner cell mass)之后,它可以发育成所有三胚层和部分胚外组织如primitive ectoderm(原始外胚层), 我们知道传统的ES细胞是来自ICM的细胞在体外建系形成的,着就是说如果从发育阶段(细胞内的基因表达水平,表观遗传水平等)来讲,epiblast很可能比ES更晚。
' y. C( B( }( P4 \6 _: D   人们早就发现人的ES细胞与小鼠的ES细胞存在很多不同，如基因表达水平，维持多能性依赖的信号通路（前者为bFGF、actinvin/Nodal,后者为LIF,BMP),但有趣的是，人们通过基因表达谱比对发现，人的ES细胞与小鼠的epiblast非常接近，这就提示我们，是不是在建人的ES系时得到了一种代表发育相对小鼠ES更晚的状态，毕竟取ICM建系有个一大概24小时的时间窗口，早一点或晚一点捡出来的系是有差别的。
! n# ?. Q- S- q4 d2 r# q# E5 s    就楼住的问题，我有这样的看法：1.据我所知epiblast只在小鼠和大鼠中建成，人的应该没有报道。建立的关键在建系用的培液和选择胚胎的时间。2.我在前面论述中说了。0 v4 v* o4 f% t2 p( a# s& M+ U+ x
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    现在有新的发现：
& Y" n* m+ l8 K7 b$ U& i5 P1。发现可以将人的ES细胞通过诱导建立出跟小鼠ES细胞状态相近的ES系http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20442331. }% D$ y5 S8 b5 r6 N2 N
2。示踪实验发现epblast可以分化为GLSC(生殖干细胞），以及其他的组织的前体细胞，这些前体细胞与器官的发育密切相关，这就提出一个很有趣的问题，这些发育早期的组织的前体细胞是不是只是发育中的一时阶段，还是与成体器官中的组织干细胞的来源，如果是那么只需要在疾病时再次激活这些潜在的细胞即可，不需要外来移植的细胞疗法了。http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/19757397: [6 }; k$ y9 t: B0 |) F' O

+ E, H! c$ j  n: A8 J# F以上为我的一点看法，不足之处在所难免，仅供探讨！呵呵

张也行

回复 9# bardey , Q. e! B- T' i9 `
你说的很好，谢谢讨论！
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Epiblast虽然只在小鼠和大鼠中建立，但是优势已经明显显现出来：稳定，多能，高效！虽然从发育上来说ESC是在EpiSC的前面，但是，不能说他的多能性不如ESC，我觉得胚胎细胞的多能性状态是一个时期，ES细胞分离出来的时候，人们说到囊胚之前，胚胎细胞是有多能性的，而现在EpiSC的发现，我们是否要延长教科书上关于“多能性的时期”的界定问题？
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并且，EpiSC和ES细胞之间可以在一定程度上相互转变，虽然EpiSC->ES更容易，但是EpiSC更稳定，并且这种相互转变能力的不对称性在一定程度上是技术性问题：也就说我们不知道某些种系动物的ES细胞培养条件是什么。并且，人的ES和hiPS都更像是EpiSC。不能因为hES更像EpiSC就怀疑hES的多能性。
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关于你说的 “一个很有趣的问题，这些发育早期的组织的前体细胞是不是只是发育中的一时阶段，还是与成体器官中的组织干细胞的来源，如果是那么只需要在疾病时再次激活这些潜在的细胞即可，不需要外来移植的细胞疗法” ，我没有太明白你的意思，麻烦你再解释一下。: m$ h) U5 b  B. n# Q  C
Epiblast作为原肠作用的前期，肯定要为三个胚层的分化做好准备（I think this is the beauty of EpiSCs），包括表达早期胚层分化相关的基因。所以，应该可以说Epiblast的细胞是各种细胞的前体吧？