左心室灌注，急！

rhmm

谁做过小鼠左心室灌注呀，用的是什么灌注的呀，血管太细，心脏太小，每次都灌注不好，各位介绍一下经验吧，感激不尽！

bigbiggirl

我灌过大鼠的，小鼠的应该好弄吧

bigbiggirl

是处死前的灌注标本吗9 W  |! _( |# G+ v+ p7 \0 e3 H. c/ z
还是其他的灌注啊

chuanbaozang

不知道你实验目的是什么，且说说我们曾经用的方法吧。我们主要是取肺。
4 z2 K1 x! i$ I) v用一次性给人打吊瓶的那套装备给小鼠的心室扎一个孔，使缓冲液滴下，然后在其外周放血，不长一会就看到其内脏尤其是肺变白了。其实也可以在其心房，不过那挺不好找的，很多人管心房那称心耳。也试过在颈动脉放血，也可以，不过弄的满胸腔是血了。7 V( ^4 T- s' W+ L$ J( L. N. ]1 u
希望能给你提示，嘿嘿

lixiaodong

+ K2 h5 }* g$ O- s8 J6 [/ x$ C/ W# q9 b) _3 H) M7 Q
小鼠麻醉好后迅速开胸，将胸骨和肋骨翻开暴露心脏，应该还在跳动。将心脏用止血钳hold住，将灌流用的针（注意针尖要磨钝，否则极易刺穿心脏），沿着左心室插入，注意不要用力过大，否则极易插穿到心肌中。应该能感觉到左心室left ventricle内的空间，如果仔细探寻的化，可以将针深入到aorta中并在外部看到。这时半打开灌流液的阀门（saline，PBS），可见右心房涨起。如不需灌流肺部，则将右心房剪开，可见血液涌出。将心脏及内部的灌流针用止血钳夹紧，固定位置，使液流通畅。一定时间后（10-20ml应该够了），换为PFA或formalin。如想灌流肺部，则只将左心房剪开就行。
2 O% I; B0 i- r0 u* H2 {, n小鼠较delicate，操作要温柔，多练几次，熟能生巧。

lixiaodong

更正：
. R/ x, _- s1 m, z* C0 C9 o"应该能感觉到左心房内的空间"---改为“应该能感觉到左心室left ventricle内的空间”，" j) y& {8 b- B; j2 e
“见心脏及内不的灌流针用止血钳夹紧"---改为“将心脏及内部的灌流针用止血钳夹紧”。

细胞海洋

已经改正

rhmm

多谢，受益匪浅，我想先用生理盐水冲净血液，然后再灌注固定液然后去取听皮层