胚胎干细胞培养中的分化问题

dilal

回复 10# 上海过客
: O! T' s' ^# G: U$ E/ f# x1 p# J& O- n9 ^) p  v8 \
谢谢，受教了

上海过客

刚好有一篇 山中的 文章 ，就讲的是  聚集的细胞的分化问题

farmer

如果是小鼠的  ES细胞 ， 一定要吹打成 单细胞 悬液 。 如果镜检还看到有 多细胞团就 可能分化 。 ...' K6 E. ?9 y( e
上海过客 发表于 2010-8-11 10:33

# E, v6 z) z% T: l. s3 g
6 v; x/ U3 `5 F/ U. @6 i5 r人的ES也适用与上述方法吗？

上海过客

人的ES细胞，家兔，猪  的ES 干性维持 通路 和小鼠的 干性维持通路，目前认为不同。0 _  J' ~' \/ M' c
' S) z0 D8 h; h$ a
人得 ES细胞目前认为 消化成为单细胞的话 会凋亡  ，具体的通路与 ROCK 这个 基因有关。+ ?4 @& o1 _8 H3 }
现在有用ROCKinhibitors 来抑制 人ES细胞克隆的单细胞凋亡  。 用 关键词可以搜到相关的文献。   
. G. R$ T3 N4 G. c9 f* J/ p
. @! J- e  V# ~, S' |+ `   目前认为 可能 人得 ES细胞培养条件还不成熟，培养出来的ES细胞有可能不是 真正的 ES细胞 。    找到 理想的 培养基条件以后 可能  现在的人得 ES细胞的传代不会像现在这么难。

farmer

我的意思是分离人ES分化细胞和未分化细胞是否可以用贴壁差异法？

上海过客

我的意思是分离人ES分化细胞和未分化细胞是否可以用贴壁差异法？
/ I/ `7 w: R& l6 Sfarmer 发表于 2010-8-24 17:34

3 l4 \$ ^, W  d% }7 `  R6 E4 R+ M+ b2 X, c! t  J
不能 消化成单细胞 来传代 怎么 用差速贴壁的方法呢？

sleepwalker

想看看分化的胚胎干细胞是什么样子的，不知道哪有图。

scienese

一般分化后的克隆状态就不好了，即使不是完全分化，只能把皿里未分化的在体视镜里拣出来

ielisa

! z6 ]% a! a, Z4 t6 b# Y* t+ D! C: k# y3 f; U* O
显微镜下标注出你们认为分化的克隆，然后胶原酶消化10min，没有细胞刮其实用lml的枪头，或者塑料移液管尖端也是可以的，轻轻一刮就下来了。如果分化的克隆很多，建议挑出好的克隆，分化的克隆就不要了，或者做其他实验。分化的克隆边缘是不规则的，消化的话需要更长的时间才能消化下来，没有分化的克隆需要的时间短一些，可以利用这个把它们分开

smartyyu

回复 上海过客 的帖子. m. C" y1 P  d$ Y) H

  T- ^7 W, k7 T( J4 l3 ^下载不了白费包包