胚胎干细胞培养中的分化问题

dilal

回复 10# 上海过客   S+ B5 W/ V8 _: u& l, [

9 Y4 b* A1 s8 A7 r谢谢，受教了

上海过客

刚好有一篇 山中的 文章 ，就讲的是  聚集的细胞的分化问题

farmer

如果是小鼠的  ES细胞 ， 一定要吹打成 单细胞 悬液 。 如果镜检还看到有 多细胞团就 可能分化 。 ...% B: ^# N0 Q3 F
上海过客 发表于 2010-8-11 10:33

+ N; X) N8 ~6 i# y

+ L0 U9 D( s# X8 D- |人的ES也适用与上述方法吗？

上海过客

人的ES细胞，家兔，猪  的ES 干性维持 通路 和小鼠的 干性维持通路，目前认为不同。: g7 x0 S% N& p; w! Q2 |
* @* _9 r, R7 n- T0 t/ g" H
人得 ES细胞目前认为 消化成为单细胞的话 会凋亡  ，具体的通路与 ROCK 这个 基因有关。1 ^5 ~: y, \4 \
现在有用ROCKinhibitors 来抑制 人ES细胞克隆的单细胞凋亡  。 用 关键词可以搜到相关的文献。   
9 D0 f6 R3 J) n7 w. u' b/ B- ~  d- z% n# z
   目前认为 可能 人得 ES细胞培养条件还不成熟，培养出来的ES细胞有可能不是 真正的 ES细胞 。    找到 理想的 培养基条件以后 可能  现在的人得 ES细胞的传代不会像现在这么难。

farmer

我的意思是分离人ES分化细胞和未分化细胞是否可以用贴壁差异法？

上海过客

我的意思是分离人ES分化细胞和未分化细胞是否可以用贴壁差异法？
- r3 g7 E2 D  |( _farmer 发表于 2010-8-24 17:34

: E3 I% e$ e* _  T: g: Y! w2 S

, Z6 N" a) `* z8 j" B0 O不能 消化成单细胞 来传代 怎么 用差速贴壁的方法呢？

sleepwalker

想看看分化的胚胎干细胞是什么样子的，不知道哪有图。

scienese

一般分化后的克隆状态就不好了，即使不是完全分化，只能把皿里未分化的在体视镜里拣出来

ielisa

, i# J% z  R$ M- K/ S" t* E. P  E/ `! v* k5 s" ?6 P3 k
显微镜下标注出你们认为分化的克隆，然后胶原酶消化10min，没有细胞刮其实用lml的枪头，或者塑料移液管尖端也是可以的，轻轻一刮就下来了。如果分化的克隆很多，建议挑出好的克隆，分化的克隆就不要了，或者做其他实验。分化的克隆边缘是不规则的，消化的话需要更长的时间才能消化下来，没有分化的克隆需要的时间短一些，可以利用这个把它们分开

smartyyu

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下载不了白费包包