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作者：刘晓华 许雷 胡彬 纪玉强 ]7 F$ w" X0 Z& x2 v. m5 g1 G
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; |$ G1 R8 u. m' M 【关键词】造血干细胞
/ r( n. l5 I, T g4 J 造血干细胞移植后白血病复发是临床面临的最大问题，主要原因是移植后在患者体内仍然有少量存活的白血病细胞，因此有必要识别移植后移植物的植入状态，为临床使用免疫抑制药物提供可靠依据［1,2］。笔者利用STR-PCR技术对3例外周造血干细胞移植进行了监测。% u# O# p% I" k5 o3 F
1对象与方法; r+ p0 X+ j" ~6 [
1.1对象选择研究病例来自临床确诊白血病患者3例并接受外周造血干细胞移植者。供受者血样HLA基因配型采用PCR-SSP方法，其中病例3为半相合，病例1、2为全相合。2 ]9 U/ V) l& W$ h
1.2方法采集供者和受者在移植前、后28天间ACD抗凝静脉血3.0ml，采用Gentra试剂盒提取DNA ，用基因定量仪测定浓度和纯度，调整浓度0.05ng/μl，纯度在1.6～1.8之间。基因分型采用ABI公司AmpF STR Identifiler试剂盒，利用ABI3100遗传分析仪收集分析数据。) c+ H. U5 s9 x" w6 }: N
2结果
4 B, ?, k8 M4 T( Z$ O5 \ 患者移植后状态：病例1、2移植后28天监测呈完全植入状态，患者移植后造血重建，为完全供者型，受者自身血细胞的基因消失。病例3虽然临床上有缓解症状，但是移植后第28天STR-PCR技术没有检测到供者基因植入的迹象。
9 P; I W% C7 y 3讨论( p0 ]1 I9 |, I: f& |3 N6 ^" K* x: O6 _
微卫星（microsatellite analysis）即短串联重复序列(short tandem repeat，STR)，它是由2～6bp重复单位构成的DNA序列，通常多态性片段长度在100～300bp，已广泛应用于造血干细胞移植后监测。干细胞移植后受者体内细胞的嵌合状态，可最直观的反映移植物的植入状态，移植后的植入状态是判断移植是否成功、移植后免疫抑制剂的合理应用、判断疾病复发及临床复发前给予干预治疗的重要依据。本实验结果显示病例1和病例2完为HLA全相合，移植后呈全植入状态，患者移植后造血重建，为完全供者型，受者自身血细胞的基因消失，病例3为HLA半相合，虽然临床上有缓解症状，但是移植后第28天利用复合扩增微卫星DNA技术没有检测到供者基因植入的迹象。
; |4 X9 b9 {" g+ Q$ q+ ~. M* }0 u 综上所述， STR-PCR技术是精确识别移植物植入状态的金标准，可以作为骨髓移植后早期识别移植物植入、检测残留微小病变、预测移植效果的有效方法。
h) d( @& m8 _. d( j% o9 t$ h 【参考文献】
0 O$ I, z5 p2 {9 L6 `1 m 1唐晓文，王玮，吴德沛，等.STR-PCR联合RT-PCR技术在慢性髓细胞白血病患者异基因造血干细胞移植后微小残留病变检测中的应用.中国实验血液学杂志，2004，12（4）：484-488。
! Q5 z) `# B8 P! Y# {& T 2邹红岩，李桢，邓志辉，等.混合脐血成人移植定量监测植入状态的实验研究.中国实验血液学杂志，2004，12（2）：179-184。# {9 Y7 Y$ M' {. `' O, V3 w- V' Q
作者单位： 260071 山东青岛，青岛市中心血站* [' Y. [ N: A# L4 Z; x1 u7 ^
(编辑：余强) |
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发表于 2009-3-3 12:20
发表于 2015-6-22 21:40
