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目的:观察牡蛎提取液在高温所致神经干细5 x" d$ z9 X! R
胞凋亡中的保护作用。+ t% ]5 L" G6 @ |' I, R7 k
方法:取孕13 d 小鼠胚胎大脑皮质细胞培' N2 w( c4 {2 r, S/ y/ S
养,采用免疫荧光法检测巢蛋白的表达以鉴
; M X; e9 @ x8 j* `! v定神经干细胞,将培养3 代的神经干细胞随7 R& {7 B# ^- C3 e/ {0 ]) d+ o# I
机分为4 组:高温对照组和牡蛎保护Ⅰ、Ⅱ、
# P- Y$ ^& k; u; i/ N3 lⅢ组(分别加入质量浓度2.5,5,10 g/L 的
: u! s/ C' D% j牡蛎提取液),同时设立培养液对照组(其中
; L2 ^+ e. z; ~) ?8 s无细胞)、培养液+牡蛎提取液对照组(其中无+ E! b4 X" |6 s( \$ l8 f
细胞),各牡蛎保护组及对照组均经过39 ℃
: A6 x2 t4 Z) n4 W7 Q/ Q- E+ t4 G高温处理。锥虫蓝染色法检测神经干细胞存3 a9 J1 ^1 X4 C; F2 H+ @; a
活率;MTT 法检测神经干细胞的增殖活性; E) f9 A \% L( p1 l4 q
蛋白质印迹方法检测神经干细胞凋亡相关蛋
" |& v2 w2 I2 X' v1 k7 U白p53 的表达。
: w- T7 _. M6 v2 Z4 A; N; i结果与结论:牡蛎保护Ⅱ、Ⅲ组中细胞的存) q. r$ u- o) T! x8 r
活率及MTT 值明显高于高温对照组(P <' Y* `$ P& `/ G# b: B
0.05);而p53 的表达则明显低于高温对照) v6 l b, i- g
组。提示牡蛎提取液对高温所致神经干细胞7 k) ?+ p1 P9 W( ~! v4 ?! O
的凋亡具有一定的保护作用,这种作用有浓
/ X) D$ X- N# M度依赖性。 |
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