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xihuzi0217

新手上路

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楼主

发表于 2010-10-18 10:34 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

我养的是小鼠的BMSCs，3周龄小鼠，雄性，48小时首次换液，以后每隔3天换一次，大概7天能融和80%，用0.25%胰酶消化3分钟，都不下来，细胞才稍微有点变圆。用的血清是GIBCO胎牛血清15%浓度，Hyclone培养液，胰酶是国产的。跪求高手指教，怎么才能使原代消化容易些，我已经被这个问题困扰2个月了，谢谢谢谢！！！！

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stefan

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沙发

发表于 2010-10-18 12:31 |只看该作者

楼主用进口的胰酶试试，加上EDTA，进口的应该含有EDTA,进口的应该不错,我用过国产的，效果真的是不敢恭维啊！祝顺利！！

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267318024

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藤椅

发表于 2010-10-18 13:16 |只看该作者

我也不知道有什么好的办法，增加消化时间看看，我同学也是遇到这样的问题，结果传代后细胞生长状态不好，确实比较头疼！

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shuangor

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板凳

发表于 2010-10-19 10:13 |只看该作者

请确定用PBS洗涤2遍了么？

在消化过程中拍打了么？' y' P1 b4 j+ E3 w+ o6 @1 r

我惧怕使用含EDTA的胰酶，对细胞壁损伤极大！做流式明明白白可见！% ~+ }5 B' m S* J
) H6 A' a6 s7 m1 S$ w! k+ r
拍打+数次吹打，不行的话那就换胰酶！