帮忙看看，我的BMSCs怎么了，第五天，附图

daviddow

没有污染，就是这个样子，可能培养基不好，我也建议更换

tanhehe1006

应该就是营养不够的问题，空泡和脂肪化是不一样的，空泡了如果再好好养（补给营养）是可以恢复原来的形态的

267318024

之前用的事HyClone 的培养基，都没有细胞长出来，现在换成GiBco的了才长成这样了，大伙给点建议，换成什么培养基，我试试！

267318024

汗了！之前两天换液，结果细胞没有长，这次说等等，三天后第一次换液，结果还是出问题了，真是不好养...............

shiqingxi

如果是刚分的化 杂细胞太多了 影响MSC的生长 建议重新取原代

shiqingxi

明显红细胞很多

267318024

用的是全培养的方法，上一次取的时候第二次换液的时候用培养基冲洗过，结果就没有细胞了，这次怕出现上次的状况，没有冲洗，很小心的换液，结果红细胞数量好像又多了，看下次换液的情况算了！

snokey

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( n3 I7 c- f/ y0 X6 B6 G我养过人的，培养基是DMEM高糖，FBS 10%，NEAA, L-Glutamine or Glutamax, sodium pyruvate.记得刚拿到的时候混有其他细胞，养过两三天后底部出现小黑点（将来的干细胞），换液后用培养基洗一两次，然后培养几天得到P0细胞。细胞长的太慢时可以加20% FBS.启始培养的培养皿不要太大，细胞有密度效应。培养基不要换太勤，细胞少的时候3-4天换一次，细胞多了2天一次，因为细胞会分泌很多生长因子到培养基中。

267318024

回复 18# snokey 9 p; N, }2 [9 ]

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- m7 r  A; f* B3 y    谢谢，我养的兔的，用的培养基成分里面就加了双抗，其他的谷氨酰胺等都没有加，文献上面好像也没有要求这个，我现在也不确定了，反正细胞是没有长好。

snokey

我养过3种人的间充质干细胞，全部用上面的培养基，效果很好。文献不可全信，养出细胞才是硬道理。你可以少量配点我说的培养基试试。注意L-Glutamine 两星期内OK， Glutamax很稳定，我一般用invitrogen的Glutamax代替L-Glutamine 。