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manybit

新手上路

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楼主

发表于 2010-10-29 10:03 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请教：如何从动物狗中获得内皮细胞

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帅哥研究员积极份子

沙发

发表于 2010-10-29 10:27 |只看该作者

取其大动脉如胸主动脉等，然后做原代培养，如果不想不狗狗搞死，可以取脐带中脐静脉的内皮，也是原代培养，不过内皮细胞一般不是很好养，原代培养不会连续传代。。。以上仅为个人愚见，仅供参考，望不吝赐教。。。。。。。。。

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小木梅

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藤椅

发表于 2010-10-29 11:53 |只看该作者

还要看你实验需要什么样的内皮细胞，一般分大血管内皮细胞，比如颈主动脉，脐静脉（实质是动脉血管），还有就是微血管内皮细胞如，脑微血管，肾小球微血管内皮细胞。内皮细胞原代确实不好培养，微血管的刚不好养。大血管的以牛胸主动脉为例一般是取10-15cm，把血渍用pbs洗干净后，两头夹紧，灌注消化酶（0.25%胶原酶：0.1%胰蛋白酶=5:1混合，不同文献可能不一样），15-30分钟，轻轻搓血管，吸取消化液，加培养液洗血管腔几次，消化液和洗液离心就是内皮细胞了。培养液可以是DMEM，M19等 20%胎牛血清，双抗，（肝素，胰岛素根据文献添加）。鉴定检测第8因子，观察weible-palade小体