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本帖最后由 细胞海洋 于 2010-11-3 16:06 编辑 ( x& Y8 h% H; X" z3 E1 r5 C& w
* b' P7 U! m$ T& Y# l! d0 I I[hide][/hide]BL O T T I N G, HY B R I D I Z AT I O N & DE T E C T I O N:AN S & S LA B O R ATO RY MA N U A L* ~" R# T. ?4 K/ c5 t0 C
TABLE OF CONTENTS. c0 u6 p2 \0 n/ o4 t1 m. s! e" o7 P
TR A N S F E R, HY B R I D I Z AT I O N & DE T E C T I O N O F NU C L E I C AC I D S
& i. r0 F! n+ e) S; o' L7 FSouthern Transfer onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2
& h$ u; j9 i' X: W) ?Northern Transfer onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .1 2
3 s0 i& L! Q+ s& x( |% f/ a0 CNucleic Acid Dot-/Slot-Blotting onto S&S Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 0
3 }5 [2 X) {( c" kColony/Lifts onto S&S Transfer Media . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .2 4) p( ]$ i, ~ V' z6 Y
S i g n a l-to-Noise Enhancement . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . . . .2 8
2 `+ L, q8 H4 K M( W3 MSolutions for Nucleic Acid Transfers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 8+ w9 M4 v& k8 x7 Y( n' u, r
Nucleic Acid References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .2 9$ n. O! W- t$ w
TR A N S F E R & DE T E C T I O N O F PR O T E I N S' ^7 A; p+ P" F; w0 w* M! _
Protein Transfer onto S&S Nitrocellulose Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .3 0
5 _1 w+ `* ]$ x% CProtein Transfer onto S&S W e s t r a n® PVDF Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 82 s- e: K$ J' B) L; I
Protein Dot-/Slot-Blotting . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 2& |8 \1 {5 y4 i [ N1 r0 V! O
Protein Transfer onto NA 45 DEAE Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. . .4 4
& N' Y" u: o6 N. R8 O% AProtein Transfer onto NA 49 CM Membranes . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 60 G2 g/ f$ e- K; m+ Y {% u
Troubleshooting Western and Dot-Blot Assays . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 7
/ J" M k! P6 G2 R" MSolutions for Protein Transfers . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 7
3 A) Y5 r! }# [- ~Protein References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .4 8: ~4 E5 \0 n# U) v( z
S & S ME M B R A N E SE L E C T I O N GU I D E . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5 0
, [$ F( C% C4 g x" Z% [# u6 L$ QNU C L E I C AC I D PU R I F I C AT I O NME T H O D S$ \0 T) B5 q+ _/ }
Isolation of DNA from Agarose Gels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .5 4
: I1 f, W3 A4 uPurification of Plasmid Mini-preps . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 0
& |. N% Z v# u5 RPurification of Oligonucleotides . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 4
" i$ p" @' ~! NPurification of PCR Products . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 6( e4 n. y X2 x! V) i+ E7 ~" `8 i5 v
Purification of Genomic DNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 8
0 q% S" p* Z% s# dPurification of RNA . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 2" P5 b9 N+ H/ P# K4 w
Nucleic Acid Purification Appendix . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 33 @4 L2 h6 S2 v/ }! j
Nucleic Acid Purification References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 3
- N8 o' C) u! l) x7 x' z% NMI S C E L L A N E O U S TO P I C S, y+ {% k& n2 X- G
Removal of EtBr from Gel Staining Solution . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .7 4
7 v" _( A* f4 P1 o% r/ Q* b1 nElectroelution of Proteins from SDS-PAGE Gels . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 。. .7 8
8 F. _# d, W3 ]) qMiscellaneous References . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .. .7 9% N' ]7 u; u- R. y
Ordering Information . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8 0 |
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