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楼主: philexchang
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养了一个月的hUC-MSCs 大家看看状态 密度咋样   [复制链接]

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包包
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发表于 2010-11-11 13:38 |只看该作者
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发表于 2010-11-13 18:10 |只看该作者
细胞状态不是很好,我和你遇到的情况一样,细胞代次稍高就老化,感觉很脏!基本上也最多也就传到20代!留个联系方式可以?方便以后交流
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发表于 2010-11-13 23:38 |只看该作者
本帖最后由 cc1986 于 2010-11-13 23:39 编辑 - v) X# k9 ^% |: D' L5 U2 D0 e; l. ]

6 r( U0 q. w3 X0 k- }楼上讨论很热烈,学习了很多,顺便贴下实验指导里面的图片,加深下印象~~图片是10倍物镜下1 A7 I' F# R6 j

6 i6 D( y3 @5 ?9 mA:40%融合,传代还早+ c# z  W( t4 U2 M3 d' p# N
B:80%融合,最佳传代时间$ x& C' i9 g7 G7 E6 H. [
C:接近100%融合,长太满,细胞会老化,活性下降。
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发表于 2010-11-14 14:50 |只看该作者
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回复 23# cc1986
" k- E! C6 R  V% a; U( T6 _: ]8 ?3 y& _" {8 e% M# C
5 w/ P2 G' W! P9 ?1 b
    学习了!

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发表于 2010-11-15 11:08 |只看该作者
不错。学习了

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发表于 2010-11-15 13:39 |只看该作者
回复 23# cc1986 4 H: ]5 |/ ?. x& [: o1 X# n
! O6 [, g3 _2 O4 Y* j. A/ l
* c' n+ v+ E  L. X1 u) p# e( o
    请问这是什么书上的啊

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金话筒 优秀会员

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发表于 2010-11-17 20:29 |只看该作者
状态不好,建议重分。
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发表于 2010-11-18 10:45 |只看该作者
你的细胞有加BFGF吗?细胞的样子看着不错
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发表于 2010-11-18 14:17 |只看该作者
个人觉得应该能传代了,就是感觉细胞比较脏。
$ Q. f6 `( C' ?- n消化用的胰酶浓度0.25%合适,时间视情况而定,看到有细胞脱落下来立即加培养基终止胰酶消化。
9 D$ {! y5 s$ z, A3 }我们常用离心为1000rmp/min,5min。效果挺不错的。
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金话筒 优秀会员 帅哥研究员 小小研究员

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发表于 2010-11-18 17:38 |只看该作者
MSC长到70-80%就要传代了,长满时就分化了! o/ L0 o# Y7 X
2 A( z" n$ _8 V1 O2 h
你的细胞这种状态该传代了! f+ |% \5 Z9 O6 m

6 |1 T( D, b' P; C: [1 z胰酶浓度在0.05%,消化时间在2-3分钟,温度是37度( d/ h# O) b& r! ]0 w0 A  s) R9 h
& {4 ?! K! _  y; A+ W" Z6 s, `
离心1200rpm,时间10分钟2 S9 s7 W- `6 N0 }2 [* u( u, f
7 M, J! ?; @8 N# W# M  J9 L
现在的细胞有点自分化了,MSC对血清要求很严
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