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楼主: philexchang
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养了一个月的hUC-MSCs 大家看看状态 密度咋样   [复制链接]

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包包
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51楼
发表于 2010-12-29 09:40 |只看该作者
干细胞之家微信公众号
离心1000转 5分钟
) l/ {3 o; G: r% G! _) M+ t0 l: I胰酶买配好的 浓度一般都是0.25  消化时间不易过长 一般1、2分钟吧  . Y1 X0 L1 B$ w; O2 v
你这个细胞已经有些老化了  密度还好  
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52楼
发表于 2010-12-30 16:38 |只看该作者
回复 hanbing 的帖子
* l6 j7 ?4 _6 W6 i; O9 e: s# \( g5 x% o/ V. a
389439694
+ A2 Y! N" B2 {3 z, L) M# w1 ]# j前些日子忙别的事 没怎么上网. [9 N4 H6 j. r+ [
以后多交流啊

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53楼
发表于 2010-12-30 16:41 |只看该作者
回复 dan 的帖子3 g  E8 R( R* Y4 w4 ~$ u
2 Y  Q! R3 t1 U2 V
请问胰酶浓度多少?

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54楼
发表于 2010-12-31 08:49 |只看该作者
0.25%胰酶,细胞已老化,可能传代也没什么改变,若是治疗用,最好取四代前细胞
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55楼
发表于 2010-12-31 08:58 |只看该作者
回复 philexchang 的帖子" N. F7 b% b. i' r2 @) R5 Q
. b/ a% K1 }3 H0 e! f# |5 v  I
不一样,每个人培养细胞的习惯和细胞的生长状态不一样,所以干细胞传代次数控制也不尽一样,还是要做检测看看才能确定,我朋友他们的是控制在10代以内
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56楼
发表于 2011-3-2 12:39 |只看该作者
    细胞状态看起来很一般,如果状态好的话还能再长一天传代。消化时胰酶使用终浓度为0.05%,消化时间与细胞状态有关,一般1~3分钟即可(胰酶需37度预温)。
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57楼
发表于 2011-3-6 20:57 |只看该作者
离心力300g左右
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58楼
发表于 2011-3-14 14:11 |只看该作者
第八代长成这样还算可以了,但是已经开始老了,再养下去也没用的,胰酶就是0.25的,我们不用离心,T25的瓶子加进去1ml,平放1min,竖起1min,然后就可以了,但是传到后面这个时间可能会有点偏差,自己试一试吧
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59楼
发表于 2011-3-25 00:58 |只看该作者
" n" v/ i) V5 Q3 g6 ?8 ?% `
离心用300g五分钟; I9 B1 k& [1 r$ s9 o/ ]
消化和室温很有关系,还是镜下观察的好,在倒置显微镜下观察,细胞之间有空隙,略变圆,有少量细胞脱落就可以终止
$ c6 A0 S/ B0 w2 F0 y$ T6 R一般细胞长到80-90%就可以传代,细胞长的太过消化有可能成片脱落
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60楼
发表于 2011-4-5 15:10 |只看该作者
感觉状态不是太好啊偏老化了,. Q! _7 w/ B2 k- {4 f: ^
胰酶0.25%,根据镜下观察决定消化时间,不超过5min,必要时放入孵箱。% E& w) H' }4 ]- B. t
离心1000rpm,5min足够了
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