求助：羊水原代培养（附图）

zgzjhzxyj

8 q( o3 ]# M( M' W( f1 c
9 g4 X2 v6 {$ r: b* p. t" \  E' E妊娠中期羊水原代培养，目的，分离鉴定得到羊水间充质干细胞。培养8天后，细胞培养皿中出现如下细胞，请教下，这些是我要的间充质干细胞吗？顺便推荐些需要鉴定的细胞表面抗原，打算用流式鉴定。谢谢

maxiaorongqp

哥们 羊水干细胞不是个好东西  趁早 洗洗睡吧

zgzjhzxyj

自己顶一下，看了别人的羊水干细胞图片，跟我的差好多啊，不知道我养的到底是什么，请高手指点，谢谢

zgzjhzxyj

自己再顶一下，看了别人的羊水干细胞图片，跟我的差好多啊，不知道我养的到底是什么，请高手指点，谢谢0 d3 j4 f, m3 J% \, H2 n. D  f& K" o8 h1 F
本文来自干细胞之家  - 中国干细胞研究员的交流论坛，http://www.stemcell8.cn，详情请看：http://www.stemcell8.cn/thread-29692-1-1.html

dyg108

首先，从图上没有办法定论是什么细胞，也没有见集落形成，所以可以怀疑不是干细胞；
) _: x7 p- V7 W; o: \2 `3 \$ O其次，间充质干细胞的鉴定也不能用一种方法就可以下结论的；1 d% i) m8 v( f5 k# C5 c" S
     建议把细胞传代一下，最好能把密度提高（可以合瓶，也可以放到小的培养器皿中，也可以把培养瓶倾斜培养等等），密度太低细胞的生长周期太长，容易变化。* v8 ^) c" A4 l; E' T

4 s# B$ U) \0 Q  V顺便说一下间充质的鉴定
( l3 O1 |, ]- u! x6 y5 o8 h0 O) N7 \: t( M7 m8 v' _6 d& A7 t) }
一、从形态上看，长梭形，漩涡状生长;$ `+ ~! `# D3 g/ J& u& y0 i& i% t
二、表型上CD44、CD29、CD166、CD90、CD73阳性，如果不全测建议可以测CD44、CD29;
3 [; d; a- d8 ~# |" R三、免疫组化或免疫荧光测波形蛋白，波形蛋白阳性，测CK19，CK19阴性

zgzjhzxyj

学习了，谢谢！

yinjiqingqq

羊水来源的细胞贴壁的有三种：上皮样，成纤维样，还有就是羊水特异细胞，你的细胞形态多样是肯定的，如果纯化，就要免疫磁珠法最好

zg_zj_hz_xyj@ya

这是我羊水原代培养得到的细胞，已经传到20代。& Q3 A1 m! ]/ J
用荧光定量PCR做了几个鉴定指标:; H2 [# G- z" [; ^
       CD45,CD29,CD73,CD44,CD166,CD105,CD90,OCT-4 表达
3 z0 ^0 ^# `  d/ v" S    CD34,CD14 未表达
$ [3 P8 @; ?6 P1 w. a4 w9 t& n由于经费问题，没有做流失鉴定，三系分化鉴定也只打算做脂肪分化。& u7 @7 k' l3 [1 R. G9 @3 p
" U* d0 c. a3 P% \
各位培养过羊水间充质干细胞的前辈们，我的这个细胞像吗？

lizzy_81

间充干鉴定主要CD73,90,44,105,29. 阴性可以做CD34,45,11b,31

细胞海洋

回复 zg_zj_hz_xyj@ya 的帖子
: n5 @6 A& F1 t: r+ ^: J# l/ ?, X) z# \0 S
建议你发一个新的帖子提问