NSC贴壁6h就分化了吗？（附图）

荤荤

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, q" ]# V' z- e& d/ u+ ^0 D. h% P/ z神经干细胞的鉴定遇到了两个问题：: Z/ P: u5 Y! u: M. A& k0 s
1.将P2和P1代的神经球接种到PDL包被过的24孔板上，培养箱孵育6小时，显微镜下观察到有不少的细胞从神经球迁出，像分化的神经元和胶质细胞。上次鉴定的时候也出现过这种现象，当时培养箱里是孵育了12小时，所以这次把时间缩短了，结果还是不行。我看有文献报道72小时还能保留其干细胞特性的吗，为什么我的实验却会出现这种现象呢？是什么原因呢？该如何解决这贴壁的时间呢？我原代取的是新生鼠的海马组织，如此容易分化是因为球中祖细胞太多，真正的干细胞太少的原因吗？有方法鉴别祖细胞和干细胞吗？该如何纯化干细胞？
! S; ^+ m% W( Y1 s2.虽然大部分细胞贴壁分化了，但是还有个别球形态还不错，于是我还是做了免疫荧光。可是在镜下发现细胞好像脱落了，是因为贴壁的时间太短了吗？这不就跟前一个问题相冲突了吗？有的细胞部分脱落，剩下了一些神经球的残骸。 请大家鉴别一下是不是神经球？
1 C$ z' {' R3 s0 G& [- h
7 b4 `# [. h6 N将图片附上，请指教！

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怎么没人发言

leedh1223

这些球你传了几代再种到24孔板上的啊，由于原代的球中细胞的异质性比较大，包含有各种各样的前体细胞，所以需要传代以后再做后续实验，建议你至少传4代左右再做免疫组化，鉴定爬出的细胞到底是什么类型的，现有文献报道最多神经干细胞向神经元、星胶和少突分化，你可以检测这三种Marker
/ o, J8 W3 d/ X3 a& J上面的图是神经球，一般包被以后最外面的细胞的确很容易分化，但这不影响球总体的性质，如果种下去时间太短，的确很容易脱落的，你可以尝试下种完24小时后再做免疫荧光

SVZ

赞同leedh1223 观点

afei198520

经过鉴定，ICC显色的不是细胞。% E+ W% e4 P6 O4 x
前面几图应该是神经球，但是是开始贴壁分化了的神经球。

echo13032619

原代的里面，含有很多其他细胞，你不能肯定这些细胞是不是全部处理掉了的

xuanxuan69

我也遇到同样的问题~