ips的传代问题

catmemory

小女子刚刚接触ips,
7 n! F/ ?, E3 k2 j2 m想请教下ips能够传代培养吗？
) U4 @: w7 g6 M+ f  c9 k. e- X大概多少代还能够保持其ips的特性呢？

rongrong

不知道你的这个问题是怎么解决的？我现在也同样遇到这个问题
" N: T, Q* N9 ~2 N8 m# z) B# f你现在传多少代了?

sunny2829

ips可以传代培养啊，至于代次嘛，是没有ES那么强~~~年前养的传了34代左右，过年因为疏于传代，ips分化了~~~无奈之下，只能重复了~~~

docqbzcn

35代以上

sdjjfangfang

如果真是iPS，传代肯定是没有问题的，可以按照ES的传代方式进行传代——酶消化和机械法。对于能传多少代，还没有研究过，不过应该是没有问题。

jefferson

目前iPS和ES在培养传代以及冻存等各方面都基本一致. 在传代上主要有两种方法,一是机械法, 利用巴氏德玻璃管拉制的针将细胞克隆切割为若干块后刮下, 再将其吸起,接种至新的培养皿内; 二是酶消化法, 利用胶原酶消化细胞克隆, 由于胶原酶比较温和,因此克隆会脱落下来但同时不会成为单细胞,收集沉降后的细胞克隆轻轻吹打后接种至新的培养皿内即可.
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日常培养iPS用的最多的是酶消化法, 但传代前最好观察细胞状态, 若存在部分分化了的克隆, 应用机械法将其刮除,然后利用酶消化法传代; 如果大部分克隆已分化, 此时应用机械法将未分化的克隆挑取传代.
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iPS可传代多久目前没具体数据, 我的传到68代了. 主流的理论认为iPS和ES一样,都具有无限增殖能力, 且在同时保持多潜能特性. 但是前两天PNAS上刚刚出来一篇论文, 用计算机建模预测骨髓中造血干细胞的寿命, 发现干细胞的自我更新只能持续一段时间, 从几个月到几年不等. 虽然是成体干细胞的数据, 但对ES和iPS具有极高的参考价值. 建议读下这篇文献：
" X3 T5 e, l) h/ j2 l
+ k! M" e; R! X( E+ m7 u1 k: o 由于干细胞容易产生突变, 建议每10代做一次核型分析确保核型正常. 如果发现细胞连续传代过程中都状态不佳, 最好重新进行一次多潜能性鉴定.