干细胞标记问题

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大家好 有做过Brdu标记干细胞的吗？3 e0 w  D% V: b2 {
细胞核标记BrdU是一种DNA前体胸腺嘧啶脱氧核甘酸类似物，它能掺入
4 Z. s" O* D4 mS期细胞单链DNA核苷酸序列替代胸腺嘧啶。只要细胞不消亡，其在DNA中
, s' T! z9 {9 s4 U5 K+ q; R的存留将是永久的[24]。BrdU抗体不与胸腺嘧啶发生交差反应，经免疫组化染色
$ [0 c% {7 {# ?+ M+ _: z即可观察BrdU在细胞内的掺入情况避免了假阳性。通过BrdU标记率检测实验，" _: R3 {- J8 ], `4 P  N, ^! p0 G
测得阳性细胞数占细胞总数的90%，具有高标记率。再次证明可以用BrdU作为
2 k, q7 f5 R- T8 G% `. l干细胞研究中，细胞示踪的标记物。 . j% ~: x; X6 ^6 g( ]
但是干细胞在体内增殖状态下单个细胞核体内的标记量不就越来越少了吗

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海洋 为什么没有回复啊

woaiIPS

你好 ：)Brdu标记干细胞
- a. F2 J4 A! ?8 yBrdu标记可以用于体内也可用于体外，体外用的比较广范
6 z6 a) w0 X4 n! |# U" }7 z) s  r你说体内追踪研究 之前会静脉注射Brdu量应该够很多细胞进入S期然后结合替换 ，体内干细胞增值的有限 因此只要进行复制的话都会有新的Brdu结合 因此单核含有Brdu的细胞数会随着干细胞增值不断变多 ，不会越来越少的把：）

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回复 3# woaiIPS
4 w1 s, r3 j, y" M: C! B
: a) v, R8 J& @0 C: S8 S/ l6 d
7 s& k3 h& E* ?4 C5 V    你好，我是将brdu标记到干细胞，然后把标记的干细胞注入到体内，过一段时间检测组织内的brdu，这时候有brdu阳性的就是我注入的干细胞。但是我做的组织的免疫组化是胞浆表达，胞核很少，这是为什么啊，是不是本身我的标记物就没有进入到胞核，在胞浆残留？

woaiIPS

第一：brdu是一种嘧啶类似物跟EB差不多，分子很小 这点你放心 肯定不会进不去细胞核。
' h0 }3 }9 Z7 Y第二: 而且即使在细胞质中也没关系 因为brdu只能在细胞复制的时候参入DNA结构当中，因此 细胞质中是不该有的 这个结果挺奇怪。
: S2 P3 z% ~+ ]! j第三：分析原因 是不是处理时间短或者brdu量不够，建议别人成功的做个正对照 然后分析下实验步骤的原因。

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. K( c( J# Q/ l. b5 c3 x4 m我做的组化是很明显的胞浆表达 这点咋解释？能加你的QQ 吗？我的422521181