慢病毒包装-磷酸钙法试剂

yuangaoqian

大家好！现在我们想利用磷酸钙法包装慢病毒，需要两种试剂：2MCaCl2和2XHBSS，之前自己配过，但效果不好，所以想请各位帮帮忙，这两种产品是否有商品化的？哪个公司的比较好，最好有货号，非常感谢！

exin11

我们也是自己配置的，还行，主要是hbss的ph值很重要。2 h' Z5 i% j5 Z

# s9 H) A2 K" Y! g( Y+ M* T% ^补充内容 (2010-11-29 11:25):
" P6 n8 E$ `  o/ W  V) f一般为7.2

yuangaoqian

谢谢！我之前配的CaCl2呈黄色，防止一段时间后有黄色沉淀析出，所以不敢用，害怕影响实验进程，所以想买商业化的。

yuangaoqian

exin11，非常感谢，不知可否将你们配制HBSS和CaCl2的具体方法告诉我呀？我看看是否我们的配制过程有问题，谢谢！

cicadacjk

所有试剂都要用进口的，pH要精确到百分位。

exin11

回复 yuangaoqian 的帖子7 W$ i8 _+ Z3 h4 |7 |

0 X* r! a4 T' n, q没问题的，cacl2要求不太高，主要是hbss，cacl2用dpbs溶解，hbss要好好的调一下ph，我之前说的7.2是我们实验室摸索的，不同环境ph要求不一样，要自己做病毒滴度测定。: [3 q, k" n; g5 A

: d0 P  G/ y) ?. e8 p" L3 j补充内容 (2010-11-29 17:44):
5 Y1 w6 ^0 ?% [用dpbs溶解11 g CaCl2 .H2O，定容至20 ml。用0.22 μm滤器过滤除菌，分装成1 ml的小份，贮存于4 ℃。
, D4 j6 U# b0 ]0 f7 n+ ~

yuangaoqian

好的，我再试试，非常感谢！

tanguixiang

我做也是用的钙转做的慢病毒，效果还不错，10CM盘制备20ML病毒，可以达到2*10 6  IU/ML
9 r1 x1 Z* C. U! }9 A) t& E7 F5 g基本上够用了，试剂都是国产的，PH到7就差不多了，一次配500ML用几年。。。

yuangaoqian

好的，非常感谢大家！

sailor

碧云天的钙转试剂盒用着还可以 但是建议还是用fugene-HD