如何解决神经干细胞球贴壁的问题？

xfyang2007123

如题，我养的神经干细胞原代就很容易贴壁，培养基应该没什么大问题（DMEM/f12）加EGF，bFGF,B27,胰岛素，肝素钠，葡萄糖！每培养瓶中加约7ml培养液（25cm培养瓶）。下面是几幅在无血清培养基中贴壁的细胞照片！

xfyang2007123

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) t* j/ U  H9 Y5 c回复 xfyang2007123 的帖子
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) P: J" _9 p7 V, e8 o继续

leedh1223

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dilal

可以采用超低吸附的培养板

xfyang2007123

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( A' L3 P8 {- h- B( Y  M* R
  O7 X; f! F& {" L9 \2 N请问你们是用的什么牌子的培养瓶呢？谢谢。货号是多少？

dilal

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) G8 w) z- r) c8 \' y* V6 D, \; z2 ?9 C2 ^
我是做胚胎干细胞的，超低吸附的培养瓶我不清楚，你可以上网查查。我最近买了一批Corning公司的超低吸附培养板，不过还没用，不知道效果如何，据说是可以降低细胞吸附的。
) Z( B& u, V6 x. R) n0 b5 l我也只是一个建议，你可以想想其他的办法，比如用琼脂糖或Polyhema铺板等。

smkx

) [2 H0 ^, Q: F1 K- k

3 O4 J% J: X& e+ [不知道是何种物种，成体还是胎儿？我做的是胎鼠的神经球培养，用24孔板和小皿培养出现贴壁，用6孔板则很少贴壁。贴壁与否和培养皿关系很大。

xfyang2007123

回复 smkx 的帖子; ]. u5 L1 s% X5 [% a
, f! ?5 a' K  g5 U
我做的是大鼠的胚胎神经干细胞。贴壁的细胞用无血清培养竟然长的还不错，估计是星形胶质细胞或少突胶质细胞了。

jennyshy

这种情况我在开始养的时候也出现过，尝试换过超低吸附的培养皿，不过后来发现用普通培养皿也照样不贴了。所以一直在想不错为什么？  n! T6 ?3 n$ t  {. ^
现在估计可能是在原代分离时的问题。胎鼠的胎龄，分离的手法等等，还有就是培养基的问题，生长因子可能不够用了- r' h% \$ u# g3 B/ r2 ]" ]$ }8 D3 P( d
我觉得不像是星形胶质细胞，因为它可以传代，少突胶质细胞形态上又不太像
: M7 h# `0 Z# M倒像是贴壁长的神经干细胞，它有明显的双极突而没有神经细胞的分支。/ p+ A( D9 ], N. D! I  h7 j6 {
  r; g9 w$ I5 ?4 y5 w# a. o
个人意见

xfyang2007123

回复 jennyshy 的帖子- v+ u" k+ y% R* E  l
& }& i9 l5 b1 B: r8 ?
你好！照片中央是神经干细胞球的贴壁部分，外周是贴壁后出现的细胞，我还没有鉴定是什么细胞，不过我用的都是无血清培养基，贴壁生长的神经干细胞生命力不知有没有这么强！我把贴壁的细胞养了一下，用的也是无血清培养基，长的还挺好，可以传代，估计是胶质细胞之类的，改天我把贴壁长的细胞照片发过来大家看看，呵呵！