如何解决神经干细胞球贴壁的问题？

xfyang2007123

如题，我养的神经干细胞原代就很容易贴壁，培养基应该没什么大问题（DMEM/f12）加EGF，bFGF,B27,胰岛素，肝素钠，葡萄糖！每培养瓶中加约7ml培养液（25cm培养瓶）。下面是几幅在无血清培养基中贴壁的细胞照片！

xfyang2007123

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leedh1223

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dilal

可以采用超低吸附的培养板

xfyang2007123

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请问你们是用的什么牌子的培养瓶呢？谢谢。货号是多少？

dilal

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+ N' c) F- R1 Q6 j6 M% B# P我是做胚胎干细胞的，超低吸附的培养瓶我不清楚，你可以上网查查。我最近买了一批Corning公司的超低吸附培养板，不过还没用，不知道效果如何，据说是可以降低细胞吸附的。' n1 h$ _# W! C6 i8 |
我也只是一个建议，你可以想想其他的办法，比如用琼脂糖或Polyhema铺板等。

smkx

6 m, T- x, n  q& u- }8 f2 S5 W/ P) A8 h0 e* S+ V: M6 [
不知道是何种物种，成体还是胎儿？我做的是胎鼠的神经球培养，用24孔板和小皿培养出现贴壁，用6孔板则很少贴壁。贴壁与否和培养皿关系很大。

xfyang2007123

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6 v1 D5 p8 |+ e6 v8 O- q我做的是大鼠的胚胎神经干细胞。贴壁的细胞用无血清培养竟然长的还不错，估计是星形胶质细胞或少突胶质细胞了。

jennyshy

这种情况我在开始养的时候也出现过，尝试换过超低吸附的培养皿，不过后来发现用普通培养皿也照样不贴了。所以一直在想不错为什么？
% g" H+ i( n/ w( K  O' B2 C现在估计可能是在原代分离时的问题。胎鼠的胎龄，分离的手法等等，还有就是培养基的问题，生长因子可能不够用了- M8 P  U1 U! o4 h7 A
我觉得不像是星形胶质细胞，因为它可以传代，少突胶质细胞形态上又不太像" V0 Y+ h" x0 J
倒像是贴壁长的神经干细胞，它有明显的双极突而没有神经细胞的分支。
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* `9 [. U, |( _& s& T, S个人意见

xfyang2007123

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' k9 a9 C/ A8 g2 l& G& w3 c; |+ R9 }: K( X
你好！照片中央是神经干细胞球的贴壁部分，外周是贴壁后出现的细胞，我还没有鉴定是什么细胞，不过我用的都是无血清培养基，贴壁生长的神经干细胞生命力不知有没有这么强！我把贴壁的细胞养了一下，用的也是无血清培养基，长的还挺好，可以传代，估计是胶质细胞之类的，改天我把贴壁长的细胞照片发过来大家看看，呵呵！