小鼠骨髓MSC测MTT - 间充质干细胞专区干细胞之家



免疫细胞治疗专区	欢迎关注干细胞微信公众号

返回列表

查看: 19357\|回复: 8	go 小鼠骨髓MSC测MTT [复制链接]

feiyang

注册会员

Rank: 2

积分: 120
威望: 120
包包: 549

楼主

发表于 2011-1-2 14:28 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

请教大家。小鼠骨髓MSC测MTT时，96孔板每个孔放多少细胞合适？因为MTT的值在0－0.7时是比较好的，超过了就不是线性关系了，是这样吗？如果超过了实验是不是就要重做了？谢谢！

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

Rank: 7 Rank: 7 Rank: 7

积分: 1464
威望: 1464
包包: 5294

优秀会员金话筒

沙发

发表于 2011-1-2 21:05 |只看该作者

每孔种植的密度在30000个细胞左右吧,

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

liujucool

注册会员

Rank: 2

积分: 82
威望: 82
包包: 2287

藤椅

发表于 2011-1-2 21:32 |只看该作者

细胞范围应在3000-30000个细胞，自己可以拿个费用的板观察下细胞生长状况，再决定种植细胞数和培养时间
最近我们也在做，最后值很难让人相信

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 2	+ 10	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 2 包包 + 10 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

frank110

注册会员

Rank: 2

积分: 78
威望: 78
包包: 79

板凳

发表于 2011-1-5 11:57 |只看该作者

MTT实验宁稀勿密，每孔种植的细胞密度在1000—3000间，尤其是间充质干细胞这类的细胞长的很快，一定要控制密度，否者就超过线性关系的OD值。96孔板周围的孔液体蒸发的快，应用PBS或者水补充，不应加实验样本，一般5个复孔。

已有 1 人评分	威望	包包	收起理由
细胞海洋	+ 5	+ 20	欢迎参与讨论

总评分: 威望 + 5 包包 + 20 查看全部评分

回复引用

举报返回顶部

若兰汀

中级会员

Rank: 3 Rank: 3

积分: 548
威望: 548
包包: 1806

优秀会员金话筒小小研究员热心会员美女研究员

报纸

发表于 2011-1-6 11:51 |只看该作者

建议依据细胞种类不同设置不同的细胞浓度梯度，每一浓度三复孔，空白对照可共用一组。一般淋巴细胞数量级为104-105个，对于增殖过快的细胞就选用103个应该较好些。这样不至于一种浓度不适导致实验重做，省时，也不会浪费过多试剂。96孔板周边一圈的孔最好不要用于实验，排除边缘效应造成的吸光值误差，实验时可以在周边孔中加灭菌水或PBS防止实验孔液体蒸发。祝实验顺利