pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

runsong

回复 深海寂寞鱼 的帖子7 j7 R! h/ k# A$ @* o+ }/ I. ^, n

: }6 Z4 C4 e( s7 ^" A- x) i谢谢你从前的指点，一个多月前我按照你的方法把载体建好了，定量PCR显示34c上调了9倍（以5s为内参，34c与5s的Delta Ct由9.9上调为6.7），现在正在进一步探求34c诱导的效应。, c5 W* b+ w( ^/ W
不知你们照此法得到的结果如何。
+ @3 }" x: F3 j+ |/ ?$ g

深海寂寞鱼

回复 runsong 的帖子7 x% f+ b$ X/ {

! _/ ^% e) E- g1 o3 g, g: i恭喜你啊。
9 T  V( Q9 N# D4 Q不知道你是做的顺转还是稳转？
; w7 f8 a" `1 @2 t9 X我们通常都是做的稳转。不同克隆间的表达水平略有差异。5 K% t* U. D* W( L/ M' `$ _
一般都是几倍到十几倍。
* x/ e7 d/ U8 Y4 U4 g" w7 f6 m' N所以好像和你的结果差不多。

sannia

回复 runsong 的帖子
6 p/ E3 o/ N; V3 ?( j
% a$ K# t% p; G; ^3 d+ d# `- f你好，我最近也要做这方面的载体。
; C, ]) ]5 E/ |! B不知道楼主能不能共享一下质粒的序列，我看看GFP与primiRNA的之间连接序列

runsong

回复 深海寂寞鱼 的帖子
( y# p/ |& B) b4 o  y* E/ W; U
" D2 e" |3 s5 k0 ^7 O* D+ f# {我做的是瞬转，转染效率约为60%，转染后3天收样。你们那里还有做稳转的吗。

runsong

回复 sannia 的帖子
5 \6 \% ~' C/ X8 X
! k$ ^, P, D$ ]  n0 e. O; C我是按照深海寂寞鱼的方法做的，附件里有全部资料，不清楚的话再联系我。

runsong

附件

sannia

感谢之至！

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
. I. h- X4 V9 Z" C2 `以后多交流

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
% _5 A2 Q. C/ x% L0 G+ H. ]以后多交流

runsong

我的课题是：miRNA在雄性生殖细胞分化和发育中的作用
  |+ o5 o% ?/ B' ^3 \以后多交流