pri-miRNA的超表达能用pEGFP-C1吗？

runsong

回复 sannia 的帖子
8 f2 ^0 y' I! k
/ h6 X! w5 m$ r' n- ]5 H我这么做只是因为经费问题，如果经费充足的话最好卖载体，或用慢病毒载体。9 ~6 v# H% `- c# j( U( l
用模拟物也很好，不过比较贵，转染试剂最配套另卖。

runsong

回复 runsong 的帖子0 u, d3 h: ?4 q$ J) N5 H

+ {4 M, s' K+ k请问你们检测miRNA表达时用的是什么引物，是加poly a还是用颈环引物。但颈环引物有两个系统，不太一样，我发了相关的帖子，不知前辈有何见解。

sannia

我是加poly A的，你说的那种方法我没有做过。我倒是建议你可以设计两条引物，都试试。
5 M# D0 V' \/ K( h: d我马上要出去度假了，回来后我们可以讨论讨论 呵呵

anla0

pri-miRNA克隆的长度大概在500bp左右，前后各延伸200bp.1 k$ Y' f3 F# @: D9 M! O& w, K
请教：miRNA表达时用什么载体？较好的都有哪些？我们现在用pSUPER,想换个载体。
  J& t! H; A- F2 E" t% }* ^5 A0 `各位前辈不吝赐教。。。

宗生萱泽

回复 anla0 的帖子/ h0 l, v  V* F0 k
6 k3 o/ N* A" z: _
请问如何找到pri-miRNA的序列呢？这500bp该怎么确定？

茅草无敌

楼主，我想问问你的microRNA扩增了多少bp啊，还有你说的加密码子是怎么加法，我不太明白

茅草无敌

回复 runsong 的帖子& o5 {0 h7 R% m
% U, _5 g- x5 d0 i! W  }1 j5 i# F
楼主，你发的那个microRNA-34的文章我下不了，能麻烦你传一份给我吗
, @1 @. _$ P( {9 v  S8 H, H) c$ a# V

wjzpwyz

我也想构建个

datouqionger

正有用的，学习一下