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楼主: shewawa
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[请教] VSVG质粒   [复制链接]

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21楼
发表于 2012-4-24 18:24 |只看该作者
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回复 shewawa 的帖子+ |% s  ~* D( @7 \. ^5 }+ f% w, m
2 ]/ J8 d: f" h& x3 X( b" i
3.platE 已经整合了env,只能感染大小鼠,至于转VSVG后包出的病毒能不能感染人,感染效率如何,值得商榷。最好由293T或plat gp。
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22楼
发表于 2012-4-24 18:35 |只看该作者
回复 shewawa 的帖子
% z4 L1 S; n3 x; T2 {' i
! `) N; ^5 c9 Q1 w: w3 }2 afugene有点浪费啊,去分子克隆上找Ca转法把,对293t我们的转染效率都在90%以上
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23楼
发表于 2012-4-24 18:39 |只看该作者
回复 robbinchen 的帖子
# q" m6 J+ u; o% ^5 \. P* E: S* |, X! }
只是插入越大包装效率越低而已,我的pRRL插入了超过8k的片断,质粒超过了14k,一样可以用,滴度一般在2000+i.u./ul
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24楼
发表于 2012-4-25 01:35 |只看该作者
我做的系统是GagPol,VSVG和带目的基因的病毒质粒按2:1:3的比例共同转染293细胞,包装出需要到慢病毒.
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25楼
发表于 2012-5-31 14:18 |只看该作者
本帖最后由 shewawa 于 2012-5-31 14:19 编辑
2 q( u: q4 }# r: }- M+ t; W* {0 }6 h! |; F8 C! E; \; g
回复 ouyi2738 的帖子* z- q2 ]7 }) H% e

+ p3 x2 }6 C1 V" E$ n关于fugene的回复:这个我们实验室换成xgene9了,据说便宜点儿。ca法我用过啊,虽然转染率很高,但不知道为什么这种方法做出来的病毒不能做出漂亮的iPS。
+ B4 U9 @' w. n( K( ?2 C- MPS:谢谢热情的回复~

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26楼
发表于 2013-7-23 22:19 |只看该作者
最近在大提那些质粒,需要高质量的质粒做慢病毒包装试剂盒,反正不好提。
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27楼
发表于 2017-10-30 18:02 |只看该作者
转染后会不会有质粒残留,若很小量的残留是不是不影响,超过多少会影响,有没有标准?
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