血浆浓度会影响细胞形态不？

tangyvhuang

之前细胞一直都是用血清5%的再养，挺好的，细长梭状，漂亮。3 f4 Z4 E( [! a( U
换了一下用血浆了，第一次算错数了，0.5%的养了两天也不错，细长梭状，发现算错数了之后新配的血浆5%结果细胞形态变了，有点短粗了，+ o6 I* U# c2 R1 |/ p. m, Z
想破脑袋也没想出来啥，赶巧了，还是其中有什么原因呢

yangjie0329

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你后面那句“发现算错数了之后新配对血浆5%结果细胞形态变了”，到底是5%呢还是0.5%。没看明白你是怎么弄的，是一直用0.5%呢，还是用了两天后来又换成5%的了。我觉得你要是从0.5%换成5%的，血清浓度升高，细胞增殖加快，细胞密度变大。我接种的骨髓间充质干细胞，有时接种的密度不一样，就发现密度大的细胞就短粗点，而密度低的就相对呈细梭形，我觉得可能是，细胞密度低，细胞间隙较大，细胞就有足够的空间伸展，呈细梭形，而细胞密度大的细胞间隙小，细胞一个紧挨一个，伸展不开，也就变得短粗了。

deron

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关于密度，我们实验室经常遇到的是：细胞密度低的时候，细胞呈长梭形，有时候伪足很长，似乎在奋力联系同伴一样；而细胞密度比较高的时候，细胞呈短小梭形。
! }) k& ^! P5 I! y/ F图和真相http://www.stemcell8.cn/thread-23698-1-1.html
7 }, d5 H% F! a  J& s" g! @注意密度低和密度高时细胞各自的状态。

deron

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关于密度，我们实验室经常遇到的是：细胞密度低的时候，细胞呈长梭形，有时候伪足很长，似乎在奋力联系同伴一样；而细胞密度比较高的时候，细胞呈短小梭形。; v, N! K( e! g  o; Y
图和真相http://www.stemcell8.cn/thread-23698-1-1.html
) B) i3 h4 q. [3 s" S9 Q/ l注意密度低和密度高时细胞各自的状态。

deron

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) Z  a7 w3 z" f) K3 t关于密度，我们实验室经常遇到的是：细胞密度低的时候，细胞呈长梭形，有时候伪足很长，似乎在奋力联系同伴一样；而细胞密度比较高的时候，细胞呈短小梭形。
) K7 D$ R( h9 u( p1 d! U% y图和真相http://www.stemcell8.cn/thread-23698-1-1.html
, l+ k# y+ u& c% G注意密度低和密度高时细胞各自的状态。

yangjie0329

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是呀，我做的骨髓间充质干细胞克隆形成，细胞就特别细长，典型的梭形，就像你说的似乎在奋力联系同伴一样。虽然整个集落挺大的，可是细胞间隙太大了，集落还没长好就要和其他集落融合在一起了，太愁人了，真希望它们能够团结在一起。

tangyvhuang

哦，我没说清楚，我的是脐带间充质干细胞。我之前是血清5%，培养，现在换成了血浆5%培养，出现了问题，就是形态变化了，细胞短了，缩了，但是我用0.5%的血浆养的形态就很好，为什么用0.5%的血浆呢？是因为我算错数了，配错了，结果细胞挺好的还，所以想问问中间有什么差别吗

deron

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# T9 A* [5 w" C血浆比血清多一个纤维蛋白原，这个蛋白没理由会引发细胞的老化反应。至于0.5%的血浆浓度，跟没有一个样。所以我认为你的细胞在0.5%的两天内已经发生了不可逆的损伤反应，即使后来换成5%的血浆，细胞的损伤累积所致的形态学反应表现为细胞形态变了，短粗。。。! n2 u: W, L+ q! U, A2 b
另外，不知道楼主之5%的血清前用养了几代，用的是哪个牌子的血清，从0.5%换到5%的血浆是采用的换液还是传代的方式？

tangyvhuang

deron 发表于 2011-1-22 08:27 / _3 ~. h4 q8 c; P
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血浆比血清多一个纤维蛋白原，这个蛋白没理由会引发细胞的老化反应。至于0.5%的血 ...

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我是原代直接收获细胞的时候用的0.5%的血浆，长了三天，看着细胞增多了，差不多也可以传代了，这个时候发现算错了，直接传代了，用5%的血浆传代接种的

deron

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9 p! a- J& Y) |$ h5 q+ M7 \如此的话，个人认为就是原始的低血浆浓度导致细胞本身发生不可逆的损伤，进而影响细胞的传代。
' B1 ]' X5 p' o+ B我们曾经使用无血清替代品培养元代的MSC细胞，开始的时候觉得长势还蛮不错的（虽然细胞代谢上明显不如有血清的阳性对照），但是一传代全漂了~~~