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脐带血MSC培养成功率问题 [复制链接]

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包包
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楼主
发表于 2011-2-14 11:56 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
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请教各位,脐带血密度梯度离心收集单个核细胞后,用DMEM/F12加15%FBS,细胞刻度约10的6次方,养了6次也没有成功,什么原因啊?大家有没有过同样的问题,能给我些什么建议吗?大家的经验脐带血的MSC成功率 有多少?
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沙发
发表于 2011-2-14 14:16 |只看该作者
脐带血MSC很难养 数量少和时间长是关键  我觉得楼主的接种密度低了些 至少要10的7次方左右才可以有可能出现一个集落 还要注意Ph的值等等问题
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藤椅
发表于 2011-2-18 14:15 |只看该作者
正准开展这方面的实验研究,学习了

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板凳
发表于 2011-2-18 14:20 |只看该作者
如果像楼上所说,脐带血MSC如此难养,心生疑问:脐带血MSC为何比骨髓MSC难养?脐带血与人的外周血有何区别呢?

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报纸
发表于 2011-2-18 14:59 |只看该作者
脐带血比脐带的MSC难养多了,你还是用脐带吧!我也曾经努力过4次,均失败了,我本来是想养脐血内皮祖细胞的。不过密度梯度离心的关键是离心机的加速和减速都要慢的那种才可以比较的分离。但是实在是挺困难的。如果有高人,就请不吝赐教了!
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地板
发表于 2012-11-6 09:20 |只看该作者
回复 haoxinaok 的帖子
: t' Z, v% @8 p+ c( s
6 j$ T8 a, v5 r; ?- C脐带血中的脐血间充质干细胞含量少,提取不容易,有时候有些足月产的甚至提取不到间充质干细胞,脐带就不一样,脐带组织里边也含有比较丰富的间充质干细胞,有个生产无血清培养基的商家告诉我,脐血间充质干细胞成功率30%左右,而脐带的100%。差距很大。骨髓方面、外周血没做过。
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7楼
发表于 2012-12-2 09:48 |只看该作者
是啊,本身脐带血间充质干细胞分离培养困难,而且随着妊娠时间的延长,脐血中msc含量是逐渐下降的,且培养时间较长。脐带是好培养,但为什么有些非要从脐血中提取,求指导?
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