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siguxiang

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楼主

发表于 2011-2-24 09:42 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

各位前辈，我想构建大肠杆菌染色体基因缺失突变体，用的自杀性质粒是pRE112，这个自杀性质粒是实验组用来构建沙门菌缺失突变体的质粒，请问我能否使用在大肠杆菌缺失突变中，另外目的片段在pRE112中插入时，有无方向要求，我要缺失的目的基因为1500bp长，想缺失其中200bp，剩余的1300bp作为同源臂是否过短，另外，缺失片段的构建想采用overlapping-PCR的方法实现，是否可行，请各位赐教！感谢！ 1 h2 Z0 u' _+ s: E