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转染2 [复制链接]

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金话筒 优秀会员

楼主
发表于 2011-3-8 09:24 |只看该作者 |倒序浏览 |打印
大家都说转染效率的高低和293T细胞的状态关系很大,那大家在培养该细胞的时候用的是什么培养基,有没有再格外添加什么营养成分,在培养时有没有需要注意的地方?我在转染293T细胞的时候,发现很多表达绿色荧光蛋白的细胞形态都是小圆形的,而其短梭形的细胞,就是铺展比较好的细胞反而都没有绿色荧光蛋白的表达,这是怎么回事,会不会影响病毒的生产,这是细胞状态不好的表现吗,没有qingbao 发帖的那种铺展的很好的形态,期待解答!
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金话筒 优秀会员

沙发
发表于 2011-3-8 13:16 |只看该作者
你又开了个贴,呵呵。还是把原来的给你链接过来好了,省得楼下的不知怎么回事。http://www.stemcell8.cn/thread-35512-1-1.html
2 b2 D4 r* |, M7 W细胞小圆形说明已经死了。你能把转染前的细胞和转染后的细胞都拍张照片拿来比较下看看不?9 C% {( \+ ?: s; C6 T5 t! E8 S
培养基就是普通培养基就可以了,不需要额外加营养成分。
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藤椅
发表于 2011-3-8 13:27 |只看该作者
转染后24h观察荧光的时候,正常情况下细胞已经长到90%左右了。细胞和细胞之间很挤,有的还叠层。看着成圆形很正常(首先确定不是楼上说的死亡的细胞)。而成梭形的可能是后来分裂的细胞,自然不会发光。
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