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楼主: athena1988620
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人骨髓间充质干细胞原代培养:求鉴定,有图(每日更新)   [复制链接]

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发表于 2011-4-19 15:10 |只看该作者
我们实验室就用骨髓直接贴壁法,养的也挺好。
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发表于 2011-4-22 12:22 |只看该作者
好羡慕能做原代人的间充质的啊
! V* D! r( ], J# b8 `; i
1 [: n7 Z9 g1 z0 b根据我的经验来说说吧:
$ h; }% T7 k) r% `* H1.根据照片基本没有贴壁细胞吧
3 ~4 @7 W7 O' v0 o/ V5 ~2.不能就说失败了,根据Friedenstein当时的结论,每个集落都市有一个细胞发展而来的,那么只要有一个间充质细胞贴壁,就有可能得到大量的细胞;我在大鼠原代的时候就有这样的情况,3天都没有看见贴壁细胞,但是再放个1周 居然发现长起来了; b6 H7 ~4 a. z  a
3.如果是初学者,又没有人带着做,我建议还是先用全骨髓法比较好。间充质在骨髓的比例很小(Friedenstein说是百万分之一)用percoll肯定会顺损失细胞,也有一定毒性。用全骨髓法线养出细胞,先得到些培养的经验和信心更好
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发表于 2011-4-25 14:27 |只看该作者
回复 飞翔的十字架 的帖子# K' O7 B% b$ l
: z* v; P6 G) s6 q) x; j3 {# {' t3 V
呵呵  不用羡慕 做人的太麻烦了 得经常往临床跑 标本也比较珍贵,我后来试了几次大鼠的 ,也试了全骨髓培养,感觉全骨髓培养的细胞状态貌似比较好,而且多洗几次也挺干净的  呵呵 谢谢你的建议  
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发表于 2011-4-25 14:34 |只看该作者
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接种密度太低

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发表于 2011-4-25 17:26 |只看该作者
图片好黑啊,看不见啊

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发表于 2011-4-29 10:15 |只看该作者
回复 柏林小杨 的帖子
; m9 U  C7 h$ z" J/ {$ Q( @  j& x/ z% Y9 f; b" h- d, O2 s* L
这个是我最近分的 不过细胞数量太少 还没有鉴定
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发表于 2011-4-29 20:42 |只看该作者
这是原代后第几天的照片?如果是第一天那些小亮点是有可能长成的,如果是很多天了存在污染的可能性,好好分析下吧
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发表于 2011-5-6 14:59 |只看该作者
才培养一天的图片,而且没有调好焦距,貌似有一些刚贴壁的细胞,现在说鉴定还早了点哦
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金话筒 优秀会员

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发表于 2011-5-6 18:24 |只看该作者
不要放弃,开始没看到,转眼就看到了。长的贼快
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发表于 2011-5-13 16:25 |只看该作者
回复 snokey 的帖子  R$ _5 r4 Z4 m# U; \( F: a+ @

) }$ S' U- Z% N+ H' k小黑点是需要的吗?!!!我用Ficoll提完了养24小时就换了液,把没贴壁的去掉了。细胞圆圆的,周围有好多小黑点,不是污染了?调整细准焦螺旋好像只能看到个蓝色的细胞核似的。我取人的骨髓是在床边拔开抗凝管,然后注射器把骨髓打进去的,这样容易污染不?您把骨髓加到Ficoll上是用什么加的?我觉得用枪不好吸,容易喷,往外打的时候也不平稳。
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