关于定量PCR

sun_happone

我想请问一下，定量PCR是不是一系列PCR的总称？一般的普通PCR和实时PCR是不是都是定量PCR的一种呢？

jun8013

普通的不是定量

sun_happone

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能说具体点吗？谢谢

jun8013

定量pCR和real time PCR我没用过,但普通不是定量，你可以搜索他们的原理，普通的PCR只是能大体算出其量，指数关系，定量pcr好像可以检查出来，目的基因数量，至于用什么原理检测的，我也不是很清楚，你可以看看他们的原理，不知道是不是同位素标记，新一代PCR仪好像去年还是过去几年开发的，你可以搜搜看，很厉害，只是价格也是相当贵。。。。

花开次第33

荧光定量PCR只是PCR系列的一种，普通的PCR凝胶电泳跑胶，不能进行定量的研究，可以定性，验证某种基因产物的表达。而荧光定量PCR（RT-PCR）可以通过Tagman探针或是Sybergreen荧光染料嵌合法实时定量的监测某种基因产物的表达。根据实验目的的要求，可以进行绝对定量，和相对定量，通过做出的标准曲线，可以估算出目的基因的模板量。

amigel

普通的PCR如果有好的竟争性内标,可以做到半定量,现在说定量PCR一般指的是实时定量PCR

jefferson

定量是一个宽泛的概念. 如果普通的PCR在做的同时, 加入一个参照基因, 其跑胶后也能作为半定量的结果. 一个例子就是现在的RT-PCR, 逆转录PCR, 在早些年就作为半定量PCR来用. 就是在扩增不同组别目的基因的同时加入内参基因, 将跑胶结果进行条带的灰度分析, 最终得到组间表达量的一个比值. 这种方法在前些年很多论文里都会用到, 现在已经用的很少了,因为精确度实在不高.
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: o* d: l$ ~# Y$ K( K现在说的定量PCR多指荧光定量PCR, 由包括相对定量和绝对定量. 相对定量是指在各样本中指定一个校对样本, 认为其内目的基因的表达量为单位1, 然后其它组的表达量通过目的基因和内参基因的比值计算后,再跟指定的校对样本比, 得到一个相对于校对样本的比值, 比如1.5, 就表示该样本的目的基因表达是校对样本内表达的1.5倍. 相对定量多用Sybrgreen染料法做, 如果需要比较准确, 就需要用Taqman探针做.' y9 h$ u, ?2 H. S

6 k4 U) ~. U& K而绝对定量是指通过检测PCR过程中产生的荧光信号, 通过标准曲线计算得出样本中目的基因的精确拷贝数, 它不是一个比值, 而确切的就是目的基因在该样本中有多少个拷贝. 这个需要用Taqman的探针来做.

daviddow

定量PCR就是real-time PCR.一般的PCR只能定性，这个可以比较不同状态下基因的表达高低。

phpzs

oooo