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myjnqr

新手上路

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楼主

发表于 2011-4-4 17:06 |只看该作者 |倒序浏览 |打印

各位实验达人关于miRNA转染实验怎么做呀谁有实验操作步骤给发一份 myjhs@163.com 载体用什么怎么构建愁啊

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l19rna

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沙发

发表于 2011-4-4 18:19 |只看该作者

我有同学做这个，我只知道他用的是电转

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wujian

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藤椅

发表于 2011-4-4 20:11 |只看该作者

合成mir的模拟体和抑制物就行，用脂质体转染就好，lipo2000看看

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liufutang

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板凳

发表于 2011-4-4 22:24 |只看该作者

电转方便虽然效率不确定

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runsong

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报纸

发表于 2011-4-4 22:51 |只看该作者

做表达载体吧，效果一般比较稳定

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myjnqr

新手上路

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地板

发表于 2011-4-15 10:51 |只看该作者

各位回帖深表感谢
是做表达载体我看文献做靶基因检测时用脂质体做过表达或沉默时用慢病毒为什么不用一样的？

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POPOLD

版主

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7楼

发表于 2011-6-18 15:32 |只看该作者

不是那样的两种方法

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wolf1978

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8楼

发表于 2011-8-16 11:57 |只看该作者

对于细胞实验而言，构建载体有些费事，可以考虑合成miRNA前体或抑制物的转染，lipofectamine 2000挺好使的！需要说明的是要做功能实验应当优先考虑miRNA前体而非模拟物，后者可能会有更多的off-target效应，要慎重！如果动物体外实验的话，构建载体尤其是病毒载体效果会好些，选择何种载体要看做什么模型了！希望对你有帮助！

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