关于293T细胞

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最近在养包慢病毒的293T细胞，每次传代时一加PBS    细胞就大片脱落，一直都很费解，求解啊！

taoqilh

主要是因为293t贴壁不牢，我们实验室的做的会出现这种情况，一般在传代的时候都很小心的打液体，加DPBS的时候不吹打细胞，将液体轻轻晃下，然后就直接加酶

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就是说传代时我们加完PBS后，然后直接加酶消化吹打么？

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293T传代前用PBS轻轻过一下，即可吸去，加入少量胰酶（能完全过一下细胞表面即可）过一下吸去，过几十秒直接加入培养基轻吹混匀即可。

如来的观音

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7 e6 R: w' o9 k/ c) o- L/ o% k
, C/ ~$ j# H* _% ]6 A% o: ?( r我养过293T，传代时我们实验室不加PBS也是可以的，用PBS洗是洗去血清（防止影响酶的活性），你也可以试试，细胞状态还好

yangpan521

DPBS只是清洗液，用来洗去多余的培养液，然后直接加胰酶消化，: j4 b  Q. O: k$ i, m

wangyimei

293T细胞贴壁性不好，就像楼上说的，传代的时候不用PBS洗也可以+ T" k) d6 i1 Z7 a+ I, d% ?
另外你在种293T细胞的时候可以用0.1%的明胶包被一下会好点，会增加一下细胞的粘附性

841961279

好的，谢谢！