原代细胞非病毒转染问题

上官鑫

大家好！请问原代细胞用非病毒的转染方法用什么转染，效率会比较高？多谢。

dqm185

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我做心肌细胞原代培养，然后使用两种转染：lipofectamine 2000, Rat Cardiomyocyte Neonatal Nucleofector Kit from Lonza。前面是脂质体转染, 后面一个是电穿的kit。在我的neonatal rat myocytes，电穿的效果好点，到60%。lipofectamine 2000在40-50%。不过，看文献里面，病毒转染可以到90%的。。。羡慕....

上官鑫

但是病毒还要包装，包装病毒深恶痛绝。

上官鑫

那还是用lipo2000，电转要死很多啊。

细胞海洋

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snokey

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做过人和老鼠的几种间充质干细胞转染，个人感觉和转染效率一般的癌细胞做起来效果差不多。我用带荧光的dsRNA看转转染效率基本>70%。电转需要很多细胞，转完以后细胞状态也不好，加上Kit也很贵。Lip2K效率高，但太毒。我用RNAiMax做reverse transfection,效率不错。但是fibroblast我也搞不定，我手里Lip2K效率也很低，那个只能电转了。7 @7 N+ T  T' T# W9 v- `$ j0 H